Anticorpo policlonale di coniglio anti-NMNAT2 per WB ed ELISA - Q9BZQ4

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di NMNAT2

• Codificata dal gene NMNAT2, la nicotinamide/nicotinato mononucleotide adenililtransferasi 2 è un enzima fondamentale nella biosintesi dei nucleotidi piridinici, che catalizza la conversione della nicotinamide mononucleotide (NMN) e dell'ATP in NAD+. Riferimenti correlati: PMID:16118205 PMID:17402747

• Accetta inoltre il substrato deamidato nicotinico mononucleotide (NaMN) con efficienza inferiore e catalizza la scissione pi#### pyrophosphorolytica inversa di NAD+, NADH e NaAD. Riferimenti correlati: PMID:16118205 PMID:17402747

• L'enzima non può utilizzare il triazofurin monofosfato come substrato e non riesce a scindere dinucleotidi fosforilati come NADP+, NADPH e NaADP+. Riferimenti correlati: PMID:16118205 PMID:17402747

• NMNAT2 funziona come attivatore della mono-ADP-ribosilazione aumentando l'attività catalitica di PARP16, portando all'ADP-ribosilazione dei ribosomi. Riferimenti correlati: PMID:34314702

• In qualità di fattore di mantenimento degli assoni, NMNAT2 ritarda la degenerazione assonale walleriana ed è necessario per la sopravvivenza degli assoni; la sua deplezione innesca la degenerazione assonale.

• A livello subcellulare, NMNAT2 si localizza sulla membrana dell'apparato di Golgi, sulla membrana delle vescicole citoplasmatiche e nel citoplasma, ed è arricchita nelle proiezioni assonali.

• È altamente espresso nelle regioni cerebrali tra cui cervello, cervelletto, lobo occipitale, lobo frontale, lobo temporale e putamen, ed è presente anche nel cuore, nei muscoli scheletrici, nel pancreas e nelle isole di Langerhans.

• Le modifiche post-traduzionali includono la palmitoilazione, che favorisce l'associazione con la membrana, e la coniugazione con l'ubiquitina; lo splicing alternativo genera molteplici isoforme proteiche.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1–302 di NMNAT2 umano, coprendo quasi l'intera lunghezza della proteina; questa ampia copertura epitopica può conferire reattività contro molteplici isoforme e ortologhi (umano, topo, ratto).
• Per il Western blot, si consiglia di utilizzare lisati di cervello o di linee cellulari neuronali in cui l'espressione endogena di NMNAT2 è elevata; è prevista una banda intorno a 34 kDa.
• Data la localizzazione nel Golgi e nel citoplasma, si raccomandano tamponi di lisi con detergenti delicati (ad es. RIPA) e i campioni devono essere validati nel sistema modello pertinente.
• Nelle applicazioni ELISA, la natura policlonale può facilitare lo sviluppo di coppie di cattura e rilevazione; tuttavia, la consistenza tra i diversi lotti deve essere confermata per i saggi quantitativi.
• L'anticorpo è adatto per rilevare NMNAT2 in campioni umani, murini e di ratto, ma la reattività crociata con altre specie deve essere testata empiricamente.

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