Anticorpo Policlonale Anti-NNMT di Coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - P40261

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NNMT

• NNMT è una metiltransferasi citoplasmatica che catalizza la N-metilazione della nicotinamide, un passaggio chiave nell'eliminazione della vitamina B3 (nicotinamide), utilizzando S-adenosil-L-metionina (SAM) come donatore di metile.
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• Consumando SAM, NNMT regola il potenziale di metilazione cellulare e media modificazioni epigenetiche, riducendo in particolare il marchio repressivo dell'istone H3K27me3, promuovendo così cambiamenti trascrizionali globali.
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• NNMT contribuisce allo stato pluripotente delle cellule staminali embrionali limitando i livelli di H3K27me3, caratteristica del panorama epigenetico pre-impianto.
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• Come regolatore metabolico, NNMT influenza la spesa energetica del tessuto adiposo bianco, la gluconeogenesi epatica e la biosintesi del colesterolo, in parte influenzando il flusso delle poliamine e le vie di recupero del NAD+.
• NNMT può N-metilare altri composti piridinici strutturalmente correlati alla nicotinamide, suggerendo un ruolo nella disintossicazione da xenobiotici.
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• Espressa prevalentemente nel fegato, con livelli inferiori in rene, polmone, muscolo scheletrico, placenta e cuore; non rilevata nel cervello o nel pancreas.
• Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione e citrullinazione, e la proteina è un membro ben caratterizzato del proteoma di riferimento con evidenza di sequenziamento diretto.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato è una proteina ricombinante che copre l'intera lunghezza di NNMT umana (aa 1–264). Questo design dovrebbe generare anticorpi che riconoscono la struttura proteica nativa; tuttavia, si raccomanda una validazione empirica per ogni applicazione.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda intorno a 30 kDa. Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di rilevamento utilizzando controlli positivi appropriati (ad es., lisato di fegato) e considerare la frazionamento subcellulare per arricchire le proteine citoplasmatiche.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, NNMT è citoplasmatica. Utilizzare protocolli di fissazione e permeabilizzazione appropriati per preservare gli antigeni citoplasmatici e validare con tessuti negativi noti (ad es., cervello).
• Per le applicazioni ELISA, è possibile testare formati diretti o sandwich, con un'attenta titolazione dell'antigene di rivestimento e dell'anticorpo. La reattività incrociata con NNMT di topo e ratto può consentire lo sviluppo di saggi multi-specie, ma l'omologia di sequenza dovrebbe essere verificata.
• Non vengono fornite diluizioni pre-validate o dati sulle prestazioni; ogni sistema sperimentale richiede un'ottimizzazione individuale.

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