Anticorpo policlonale di coniglio anti-NNMT per WB, IHC-P, IF-P, ELISA - P40261

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della NNMT

• La NNMT è una metiltransferasi citoplasmatica che catalizza la N-metilazione della nicotinamide, utilizzando la S-adenosil-L-metionina (SAM) come donatore di metile, per produrre N1-metilnicotinamide (MNA) e S-adenosil-L-omocisteina (SAH). Ciò costituisce una delle principali vie di eliminazione della nicotinamide/vitamina B3. Riferimenti correlati: PMID:21823666 PMID:23455543 PMID:8182091
• Consumando SAM, la NNMT riduce il potenziale di metilazione cellulare, limitando direttamente la disponibilità di SAM per altre metiltransferasi. Questa attività media attivamente la riprogrammazione epigenetica a livello genomico, in particolare attraverso l'ipometilazione di marcatori istonici repressivi come H3K27me3. Riferimenti correlati: PMID:23455543 PMID:26571212 PMID:31043742
• Nelle prime fasi dello sviluppo, la NNMT contribuisce ai bassi livelli di marcatori istonici repressivi che caratterizzano lo stato pluripotente pre-impianto delle cellule staminali embrionali. Riferimenti correlati: PMID:26571212
• La NNMT funge da regolatore metabolico nel tessuto adiposo bianco, influenzando il dispendio energetico, la gluconeogenesi epatica e la biosintesi del colesterolo. Negli adipociti bianchi, regola il flusso delle poliammine e, consumando nicotinamide, controlla i livelli di NAD+ attraverso la via di recupero.
• Il prodotto N1-metilnicotinamide regola ulteriormente l'acetilazione delle proteine negli epatociti reprimendo l'ubiquitinazione e aumentando la stabilità della deacetilasi SIRT1.
• La NNMT può inoltre N-metilare altri composti piridinici strutturalmente correlati alla nicotinamide, coinvolgendola nella detossificazione degli xenobiotici. Riferimenti correlati: PMID:30044909
• Localizzazione subcellulare: la NNMT è prevalentemente citoplasmatica.
• Espressione tissutale: la NNMT è espressa prevalentemente nel fegato, con livelli inferiori nel rene, nel polmone, nel muscolo scheletrico, nella placenta e nel cuore. Non è rilevata nel cervello o nel pancreas.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo policlonale di coniglio è stato prodotto utilizzando la NNMT umana ricombinante a lunghezza intera (amminoacidi 1-264). Sulla base dei dati di reattività crociata, si prevede che rilevi la proteina endogena in campioni umani, murini e di ratto.
• Per il western blot (WB), il peso molecolare previsto della NNMT è di circa 30 kDa. Si consiglia di utilizzare una percentuale di gel e controlli di caricamento appropriati durante l'analisi dei lisati tissutali, in particolare del fegato, dove la NNMT è altamente espressa.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF-P), validare il pattern di colorazione in tessuti noti per esprimere la NNMT, come le sezioni di fegato, e includere controlli negativi appropriati per confermare la specificità.
• Nelle applicazioni ELISA, ottimizzare l'antigene di rivestimento e la concentrazione dell'anticorpo per raggiungere la sensibilità desiderata.
• Considerato il ruolo della NNMT nella metilazione e nell'epigenetica, questo anticorpo può essere utile nello studio delle variazioni dell'espressione della NNMT in diverse condizioni metaboliche o dello sviluppo.

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