Anti-NNMT Rabbit PolymAb® per WB - P40261

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della NNMT

• La NNMT (nicotinamide N-metiltransferasi) catalizza la N-metilazione della nicotinamide utilizzando la S-adenosil-L-metionina e producendo N1-metilnicotinamide. Questa reazione rappresenta la principale via di eliminazione della nicotinamide/vitamina B3. Riferimenti correlati: PMID:21823666, PMID:23455543, PMID:8182091
• Consumando S-adenosil-L-metionina, la NNMT regola il potenziale di metilazione cellulare, determinando una globale ipometilazione di marcatori istonici repressivi come H3K27me3. Questa attività media cambiamenti epigenetici e trascrizionali diffusi. Riferimenti correlati: PMID:23455543, PMID:26571212, PMID:31043742
• Nel contesto dello sviluppo, la NNMT contribuisce ai bassi livelli di modificazioni istoniche repressive che caratterizzano le cellule staminali embrionali pluripotenti durante lo stato pre-impianto. Riferimenti correlati: PMID:26571212
• La NNMT agisce anche come regolatore metabolico nel tessuto adiposo bianco (dispendio energetico e flusso delle poliammine) e nel fegato (gluconeogenesi e biosintesi del colesterolo). Attraverso il suo prodotto N1-metilnicotinamide, può stabilizzare la deacetilasi SIRT1 e regolare l'acetilazione delle proteine.
• L'enzima può N-metilare altre piridine strutturalmente correlate alla nicotinamide, suggerendo un ruolo nella detossificazione degli xenobiotici. Riferimenti correlati: PMID:30044909
• La NNMT è espressa prevalentemente nel fegato, con livelli inferiori nel rene, nei polmoni, nel muscolo scheletrico, nella placenta e nel cuore. Non è rilevata nel cervello o nel pancreas.
• La proteina è localizzata nel citoplasma e appartiene alla famiglia delle metiltransferasi, utilizzando la S-adenosil-L-metionina come donatore di metile.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 1-264 della NNMT umana a lunghezza completa, fornendo un'ampia regione di riconoscimento degli epitopi. Tenerne conto nella progettazione di esperimenti di troncamento o mappatura dei domini.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda a circa 30 kDa. Validare nel sistema di campionamento pertinente e utilizzare condizioni appropriate di denaturazione e riduzione per una rilevazione ottimale.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), si consiglia di ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione in base al tipo di cellula bersaglio, al fine di preservare la localizzazione citoplasmatica.
• Nei saggi di immunoprecipitazione (IP), il formato monoclonale di coniglio garantisce elevata specificità e compatibilità con i protocolli IP standard.
• Per l'ELISA, questo anticorpo può essere utilizzato sia in formato diretto sia in formato di cattura. Si consiglia di titolare la concentrazione dell'anticorpo per stabilire il rapporto segnale/rumore ottimale.
• La reattività crociata è confermata per la NNMT umana, murina e di ratto. Per altre specie, verificare preventivamente l'omologia di sequenza.

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