Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Nogo (RTN4) per WB, IF/ICC, ELISA - Q9NQC3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di Nogo

• La reticolone-4 (RTN4), nota anche come Nogo, è una proteina di membrana del reticolo endoplasmatico (RE) che induce la formazione e la stabilizzazione dei tubuli del RE, regolando la morfogenesi della membrana.
  Riferimenti correlati: PMID:24262037, PMID:25612671, PMID:27619977
• Influenza inoltre l'espansione dell'involucro nucleare, la formazione del complesso del poro nucleare e la corretta localizzazione delle proteine della membrana nucleare interna.
  Riferimenti correlati: PMID:26906412
• Nogo agisce come fattore regolatore dello sviluppo della crescita dei neuriti, regolando negativamente l'adesione assonale e la crescita degli assoni, mentre favorisce la ramificazione dei neuriti.
  Riferimenti correlati: PMID:10667797, PMID:11201742
• Inibisce l'angiogenesi del sistema nervoso centrale limitando la diffusione, la migrazione e la formazione di gemme da parte delle cellule endoteliali microvascolari cerebrali.
• Nogo modula il rimodellamento vascolare, la biosintesi degli sfingolipidi endoteliali e la regolazione della pressione sanguigna.
• Nel sistema immunitario, facilita la migrazione transendoteliale dei leucociti, il traffico di TLR9 verso gli endolisosomi e l'espressione delle citochine durante l'infiammazione e la riparazione dei tessuti.
• L'isoforma B e l'isoforma C inibiscono l'attività di BACE1 e la processazione della proteina precursore dell'amiloide.
  Riferimenti correlati: PMID:16965550
• Nogo sequestra le proteine antiapoptotiche Bcl-xl e Bcl-2 nel RE, riducendone l'attività protettiva.
  Riferimenti correlati: PMID:11126360
• Le molteplici isoforme mostrano un'espressione tessuto-specifica: l'isoforma A nel cervello e nei testicoli; l'isoforma B è ampiamente espressa ad eccezione del fegato; l'isoforma C nel cervello, nei muscoli scheletrici e negli adipociti; l'isoforma D è specifica dei testicoli.
• A livello subcellulare, Nogo è localizzata nella membrana del reticolo endoplasmatico, nella membrana cellulare, nelle giunzioni cellulari e nelle sinapsi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 60–160 di Nogo umano (NP_065393.1), una regione che può essere conservata in alcune isoforme. Si consiglia di validare il rilevamento specifico dell'isoforma nel proprio modello cellulare o tissutale.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda predominante intorno a 130 kDa, ma le dimensioni delle isoforme possono variare. Utilizzare controlli positivi appropriati (ad esempio, lisato cerebrale) e ottimizzare la diluizione dell'anticorpo.
• Per l'immunofluorescenza/ICC, si raccomanda la permeabilizzazione per consentire l'accesso alla localizzazione nella membrana del RE. La co-colorazione con un marcatore del RE può confermare la specificità del target.
• L'anticorpo mostra reattività crociata con campioni umani, di topo e di ratto; eseguire sempre una validazione specie-specifica quando si passa da un sistema sperimentale a un altro.
• Nell'ELISA, abbinare questo anticorpo a un sistema di cattura/rilevamento appropriato; si consiglia di eseguire titolazioni preliminari a scacchiera per determinare le concentrazioni di lavoro ottimali.

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