Anticorpo policlonale anti-NOL3 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O60936

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della proteina nucleolare 3 (NOL3)

• NOL3 (Proteina nucleolare 3), nota anche come repressore dell'apoptosi con CARD (ARC) o Nop30, è una proteina multifunzionale codificata dal gene NOL3 nell'uomo. Appartiene alla famiglia dei repressori dell'apoptosi e contiene un dominio CARD.
• NOL3 blocca la via apoptotica estrinseca interferendo con l'assemblaggio del complesse di segnalazione indotto dalla morte (DISC) attraverso interazioni con FAS e FADD, e limitando la disponibilità di CASP8 tramite localizzazione mitocondriale dipendente dalla fosforilazione (Per somiglianza).
• Nella via intrinseca, NOL3 si lega direttamente a BAX, impedendo la sua attivazione, la disfunzione mitocondriale e il rilascio di fattori pro-apoptotici. Riferimenti correlati: PMID:15004034
• NOL3 agisce come tampone del calcio citosolico, dissociandosi da CASP8 per mantenere l'omeostasi del calcio, inibendo così la morte cellulare mediata dal calcio. Riferimenti correlati: PMID:15509781
• Altri ruoli anti-apoptotici includono la soppressione dell'apoptosi indotta da stress ossidativo (tramite il blocco dell'attivazione di CASP2 e della translocazione di BAX), l'apoptosi indotta da ipossia (inibizione del rilascio di citocromo c) e la necrosi indotta da TNF (abolendo il reclutamento di RIPK1 al complesso I) (Per somiglianza).
• La localizzazione subcellulare include il nucleolo, il citoplasma, i mitocondri, il reticolo sarcoplasmatico e la membrana, coerente con le sue diverse funzioni nello splicing dell'RNA e nella morte cellulare.
• Specificità tissutale: altamente espresso nel cuore e nel muscolo scheletrico; rilevato a bassi livelli nella placenta, nel fegato, nel rene e nel pancreas.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot (WB), è prevista una banda specifica a circa 23 kDa in condizioni riducenti denaturanti. Si consiglia l'uso di lisati di cuore o muscolo scheletrico come controlli positivi.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene. Si dovrebbe osservare una colorazione positiva nei cardiomiociti o nelle fibre muscolari scheletriche; considerare l'uso di controlli isotipici per confermare la specificità.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), notare che NOL3 presenta una colorazione sia nucleare che citoplasmatica. La colorazione combinata con marcatori di organelli (es. mitotracker per i mitocondri) può aiutare a confermare il targeting subcellulare.
• Quando si imposta un ELISA, l'immunogeno ricombinante a lunghezza intera può fungere da standard; la diluizione dell'anticorpo dovrebbe essere ottimizzata empiricamente per il formato specifico dell'analisi.
• A causa della natura policlonale, la coerenza tra lotti deve essere monitorata; si consiglia una validazione iniziale nel sistema di campione pertinente prima di studi su larga scala.

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