Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-NONO/p54nrb per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15233

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NONO/p54nrb

• NONO/p54nrb è una proteina legante DNA e RNA che si lega alle sequenze di DNA ottamerico a doppio filamento, nonché al DNA a filamento singolo e all'RNA, svolgendo un ruolo centrale nei processi nucleari.
  Riferimenti correlati: PMID:11525732, PMID:12403470, PMID:26571461
• Funziona come eterodimero con SFPQ per partecipare allo splicing del pre-mRNA e interagisce con l'U5 snRNA tramite una sequenza ricca di purine.
  Riferimenti correlati: PMID:12403470
• Insieme a PSPC1, NONO è essenziale per la formazione dei paraspeckle nucleari, corpi subnucleari coinvolti nella ritenzione e nell'editing dell'RNA.
  Riferimenti correlati: PMID:22416126
• L'eteromero SFPQ-NONO svolge un ruolo nella riparazione delle rotture double-strand del DNA tramite non-homologous end joining (NHEJ), stabilizzando le estremità del DNA accoppiate e cooperando col dimero Ku70/Ku80.
  Riferimenti correlati: PMID:15590677
• NONO contribuisce alla regolazione trascrizionale; per esempio, forma un complesso con SFPQ e NR5A1 per controllare l'attività del promotore CYP17 in risposta al cAMP.
  Riferimenti correlati: PMID:11897684
• Reprime l'eterodimero CLOCK-BMAL1 per regolare i ritmi circadiani, svolgendo ruoli importanti nella regolazione dell'RNA sinaptico e nell'organizzazione della sinapsi GABAergica.
• NONO partecipa alla risposta immunitaria innata ai virus a DNA assemblandosi nel complesso HDP-RNP, che facilita la fosforilazione di IRF3 e attiva la via cGAS-STING, modulando così l'immunità antivirale.
  Riferimenti correlati: PMID:28712728, PMID:30270045
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente nucleare, inclusi nucleolo, speckle nucleari e cromosomi; è ampiamente espresso in tutti i tessuti, ed è presente in cuore, cervello, placenta, polmone, fegato, muscolo scheletrico, rene, pancreas e linee cellulari di tumore al seno.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 372-471) del NONO/p54nrb umano, garantendo specificità per il bersaglio; validare la banda attesa di 54 kDa in WB utilizzando lisati di cellule umane, murine o di ratto.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare fissazione e permeabilizzazione per evidenziare speckle nucleari e paraspeckle; si consiglia la co-colorazione con un anticorpo anti-SFPQ per visualizzare la localizzazione dell'eterodimero.
• Nelle applicazioni IHC-P, confermare i pattern di colorazione con controlli tissutali appropriati e la titolazione dell'anticorpo, concentrandosi sull'espressione nucleare in tessuti noti per essere positivi come cervello o fegato.
• Utilizzare l'ELISA per la rilevazione quantitativa delle proteine o lo screening; si ricorda che la reattività è stata dimostrata per le specie umana, mouse e ratto.

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