Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-NOP10 per WB, IHC-P, IP, ELISA - Q9NPE3

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NOP10

• NOP10 (Proteina nucleolare 10), nota anche come NOLA3 e DKCB1, è una subunità centrale del complesso ribonucleoproteico nucleolare piccolo (snoRNP) H/ACA.
• Questo complesso è essenziale per la biogenesi dei ribosomi e la manutenzione dei telomeri, catalizzando la pseudouridilazione dell'rRNA—una modifica in cui l'uridina viene isomerizzata in pseudouridina (PubMed:32554502). Riferimenti correlati: PMID:32554502
• NOP10 si localizza prevalentemente nel nucleolo e nei corpi di Cajal all'interno del nucleo, in linea con il suo ruolo nella modificazione e processamento dell'RNA.
• È implicato nel processamento e nel traffico intranucleare di TERC, il componente di RNA della telomerasi, contribuendo così all'omeostasi dei telomeri.
• Mutazioni nel gene NOP10 sono associate alla discheratosi congenita, un disturbo multisistemico che può includere cataratta, sordità e altre caratteristiche cliniche, sottolineandone l'importanza nelle malattie umane.
• Parole chiave aggiuntive da UniProt includono: Struttura-3D, variante di malattia, proteoma di riferimento, ribonucleoproteina, biogenesi dei ribosomi, processamento dell'rRNA.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 1-64 di NOP10 umano, una regione che condivide un'elevata omologia di sequenza con topo e ratto, supportando la reattività incrociata osservata.
• Per il western blot, il peso molecolare previsto di NOP10 è di circa 8 kDa. Considerare l'uso di un gel SDS-PAGE al 15% o di un gel a gradiente e di una membrana PVDF con pori da 0,2 µm per garantire un trasferimento efficiente di questa piccola proteina.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene (ad esempio, recupero dell'epitopo indotto dal calore con tampone citrato, pH 6.0) e la diluizione dell'anticorpo primario per ogni tessuto e protocollo di fissazione.
• Per l'immunoprecipitazione (IP), confermare la compatibilità con il tampone di lisi scelto e la concentrazione di anticorpo; una pre-pulizia può ridurre il legame aspecifico.
• Nell'ELISA, eseguire titolazioni a scacchiera per determinare le concentrazioni ottimali dell'antigene di rivestimento e dell'anticorpo; il peptide immunogeno suggerisce un potenziale utilizzo in formati ELISA diretti o sandwich.
• Poiché NOP10 funziona nel nucleo/nucleolo, la frazionamento subcellulare può migliorare il rilevamento nei saggi di western blot o IP.

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