Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-NOTCH2 per WB, IF/ICC, ELISA - Q04721

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NOTCH2

• NOTCH2 (Proteina 2 omologa del locus neurogenico notch), nota anche come AGS2, HJCYS, hN2, è un ampio recettore transmembrana di tipo I a passaggio singolo che svolge un ruolo centrale nella via di segnalazione Notch, governando le decisioni sul destino cellulare.
• In seguito al legame con i ligandi legati alla membrana Jagged-1, Jagged-2 o Delta-1, il dominio intracellulare (NICD) viene rilasciato e si trasloca nel nucleo, dove forma un complesso attivatore trascrizionale con RBPJ per indurre geni bersaglio come l'enhancer del locus split. Riferimenti correlati: PMID:21378985 PMID:21378989
• NOTCH2 appartiene alla famiglia dei recettori NOTCH, caratterizzata da molteplici ripetizioni extracellulari simili a EGF e ripetizioni intracellulari di ankirina (ANK), entrambe essenziali per il legame del ligando e la trasduzione del segnale.
• A livello subcellulare, NOTCH2 si localizza alla membrana cellulare; in seguito all'attivazione, il NICD entra nel nucleo, e la proteina è anche rilevata nel citoplasma.
• La proteina è soggetta a glicosilazione e fosforilazione, contiene legami disolfuro ed è una fosfoproteina; è classificata sotto le parole chiave UniProt come proteina di regolazione trascrizionale, proteina dello sviluppo e glicoproteina.
• NOTCH2 è ampiamente espresso, con alti livelli nel cervello, cuore, rene, polmone, muscolo scheletrico e fegato, e mostra un'espressione ubiquitaria durante lo sviluppo embrionale.
• Nella biologia degli osteoclasti, NOTCH2 collabora con RELA/p65 per potenziare l'attività del promotore NFATc1, promuovendo la differenziazione indotta da RANKL, e supporta anche il self-renewal delle cellule del cancro al fegato. Riferimenti correlati: PMID:29149593 PMID:25985737

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 1697–1819 all'interno della regione citoplasmatica di NOTCH2 umano. Questa sequenza è altamente conservata tra umano, topo e ratto, supportando un'ampia reattività.
• Per il Western blot, attendersi una banda vicino a 265 kDa per NOTCH2 a lunghezza intera; prodotti di clivaggio possono apparire a pesi molecolari inferiori. È consigliabile la validazione in linee cellulari che esprimono NOTCH2 (ad es., modelli di cancro al fegato o osteoclasti).
• Nell'immunofluorescenza/ICC, l'accessibilità dell'epitopo potrebbe richiedere la permeabilizzazione per il rilevamento intracellulare; la localizzazione nucleare può essere visualizzata in condizioni appropriate di attivazione da ligando.
• Quando utilizzato in ELISA, l'anticorpo può fungere da reagente di cattura o di rilevamento per NOTCH2 umano, di topo o di ratto, ma le concentrazioni ottimali per il coating devono essere determinate empiricamente.

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