Anticorpo Policlonale Anti-NOX2/gp91phox per WB, ELISA - P04839

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NOX2/gp91phox

• NOX2/gp91phox, noto anche come CYBB o NADPH ossidasi 2, è la subunità catalitica a catena pesante del complesso del citocromo b-245 dei fagociti.
• La subunità catalitica media il trasferimento di elettroni dalla NADPH citosolica all'O2 per produrre anione superossido, un precursore delle specie reattive dell'ossigeno fondamentale per l'uccisione microbica (PubMed:15338276, PubMed:36241643, PubMed:36413210). Riferimenti correlati: PMID:15338276 PMID:36241643 PMID:36413210
• Il trasferimento di elettroni coinvolge la riduzione sequenziale di FAD e due cofattori eme per ridurre O2 (PubMed:38355798). Riferimenti correlati: PMID:38355798
• L'attivazione richiede l'assemblaggio delle subunità citosoliche (es. p47-phox/NCF1) con il citocromo b-245 legato alla membrana, triggerato da fosforilazione e traslocazione membranare (PubMed:19028840, PubMed:38355798). Riferimenti correlati: PMID:19028840 PMID:38355798
• Localizzato principalmente sulla membrana cellulare e sulla membrana fagosomiale dei fagociti.
• Rilevato nei neutrofili, dove svolge un ruolo centrale nel burst respiratorio.
• Mutazioni nel gene CYBB causano la malattia granulomatosa cronica (CGD) legata all'X, caratterizzata da produzione difettosa di superossido e infezioni ricorrenti.
• Contiene domini di legame per FAD e NADPH, due emi, è N-glicosilato; regolato da fosforilazione e ubiquitinazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 101-200 di NOX2/gp91phox umano; l'anticorpo policlonale ottenuto può riconoscere più epitopi all'interno di questa regione. Si raccomanda di validare la specificità utilizzando controlli positivi (es. lisati di neutrofili) e negativi.
• Per il Western blotting, è prevista una banda principale intorno ai 65 kDa per la forma non glicosilata; bande aggiuntive a pesi molecolari maggiori possono corrispondere alle specie glicosilate (gp91phox). Ottimizzare di conseguenza le condizioni di blocco e rilevazione.
• L'anticorpo mostra reattività crociata con topo e ratto; tuttavia, a causa delle variazioni di sequenza, confermare la reattività nel vostro specifico sistema modello.
• Nelle applicazioni ELISA, considerare saggi di competizione peptidica per valutare la specificità.
• Poiché il bersaglio è una proteina transmembrana, l'inclusione di detergenti delicati nei buffer di lisì può migliorare la solubilizzazione.

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