Anticorpo Policlonale Anti-NOX2/gp91phox per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P04839

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NOX2/gp91phox

• NADPH ossidasi 2 (NOX2), nota anche come gp91phox, è la subunità catalitica del complesso NADPH ossidasi dei fagociti, un enzima critico nell'immunità innata.
• Catalizza il trasferimento di elettroni dal NADPH citosolico all'ossigeno molecolare per produrre anione superossido, una specie reattiva dell'ossigeno essenziale per l'uccisione microbica. Riferimenti correlati: PMID:15338276 PMID:36241643 PMID:36413210
• Il trasferimento di elettroni procede tramite flavina adenina dinucleotide (FAD) e due molecole di eme, culminando in una reazione di sfera esterna che genera superossido. Riferimenti correlati: PMID:38355798
• L'attivazione coinvolge il legame dipendente da fosforilazione di NCF1/p47-phox citosolico al C-terminale di CYBA/p22-phox, portando all'assemblaggio del complesso attivo sulla membrana plasmatica o sulla membrana fagosomiale. Riferimenti correlati: PMID:19028840 PMID:38355798
• Si localizza principalmente sulla membrana plasmatica e sulle membrane fagosomiali, posizionandosi per il controllo spaziale della produzione di specie reattive dell'ossigeno.
• Esprime prevalentemente nei neutrofili, in linea con il suo ruolo nel burst ossidativo dei fagociti professionali.
• Le mutazioni nel gene CYBB che codifica per NOX2 sono associate alla malattia granulomatosa cronica legata all'X, un'immunodeficienza caratterizzata da un burst respiratorio compromesso e infezioni ricorrenti.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione citoplasmatica di NOX2 (aa 385–570), suggerendo che l'anticorpo possa riconoscere sia le conformazioni denaturate che native; valuta la sua idoneità per WB e immunofluorescenza in base alla tua preparazione del campione.
• Per il WB, il peso molecolare previsto per il precursore è di ~65 kDa; la glicoproteina matura può migrare a ~91 kDa. Convalida la banda osservata nel tuo lisato specifico e includi controlli appropriati.
• In IHC-P e IF/ICC, aspettati una colorazione di membrana e fagosomiale. È necessaria un'adeguata permeabilizzazione per l'accesso all'epitopo intracellulare; ottimizza le condizioni di fissazione e permeabilizzazione.
• Per l'ELISA, può essere utilizzato un rivestimento con peptide o proteina ricombinante per catturare l'anticorpo. Considera il buffer di rivestimento, le condizioni di blocco e la titolazione dell'anticorpo per stabilire un rapporto segnale-rumore ottimale.
• La reattività incrociata con topo e ratto suggerisce la conservazione dell'epitopo; convalida la specificità in queste specie mediante tessuto knockout o competizione con peptide.
• Gli studi funzionali possono coinvolgere la stimolazione dei fagociti (ad es. con PMA) per osservare la traslocazione o un rilevamento potenziato; assicurati controlli appropriati per lo stato di attivazione.

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