Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-NOX2/gp91phox per WB ed ELISA - P04839

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NOX2/gp91phox

• NOX2 (gp91phox), codificato dal gene CYBB, è la subunità catalitica del complesso NADPH ossidasi dei fagociti, noto anche come catena pesante del citocromo b-245.
• Media il trasferimento di elettroni dal NADPH citosolico all'ossigeno molecolare, generando l'anione superossido (O2•−) essenziale per la difesa dell'ospite. Riferimenti correlati: PMID:15338276, PMID:36241643, PMID:36413210
• L'attivazione del complesso NADPH ossidasi richiede l'assemblaggio di subunità citosoliche (es. NCF1/p47-phox) con il complesso centrale legato alla membrana, innescato dal legame dipendente da fosforilazione. Riferimenti correlati: PMID:19028840, PMID:38355798
• La proteina contiene siti di legame per FAD, NADP e due gruppi eme, facilitando i passaggi sequenziali di trasferimento degli elettroni per la produzione di superossido.
• Localizzata nella membrana plasmatica e nella membrana fagosomiale, consente la generazione diretta di specie reattive dell'ossigeno (ROS) durante la fagocitosi.
• Soggetta a multiple modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione, glicosilazione e formazione di legami isopeptidici, che possono regolare l'attività e il traffico.
• Le mutazioni in CYBB causano la malattia granulomatosa cronica (CGD), un'immunodeficienza caratterizzata da una produzione difettosa di superossido.
• Rilevata prevalentemente a livello proteico nei neutrofili, evidenziando il suo ruolo nelle risposte immunitarie innate.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 100–200 di NOX2/gp91phox umano. Questa regione può comprendere domini extracellulari o prossimali alla membrana, suggerendo che l'anticorpo possa riconoscere sia la proteina nativa che denaturata.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda intorno a 65 kDa in condizioni riducenti; convalidare il segnale in lisati di neutrofili umani, di topo o di ratto pertinenti.
• Quando si utilizza l'ELISA, considerare di rivestire con il peptide immunogeno o la proteina NOX2 ricombinante per confermare la specificità.
• Poiché l'attivazione di NOX2 coinvolge l'assemblaggio del complesso, l'anticorpo può essere utile per saggi di pull-down per studiare le interazioni proteina-proteina, ma tali applicazioni dovrebbero essere ottimizzate individualmente.

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