Anticorpo policlonale anti-NOXA2/p67phox per WB, IF-P, ELISA - P19878

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di NOXA2/p67phox (NCF2)

• Il fattore citosolico dei neutrofili 2 (NCF2), noto anche come NOXA2, p67-phox, p67-PHOX e fattore dell'ossidasi dei neutrofili da 67 kDa, è una subunità citosolica del complesso dell'ossidasi NADPH dei fagociti.
• NCF2 è essenziale per la produzione dell'anione superossido (O2(-)), mediando il trasferimento di elettroni da NADPH a O2 all'interno del complesso dell'ossidasi NADPH attivato (PubMed:12207919, PubMed:38355798). Riferimenti correlati: PMID:12207919, PMID:38355798
• L'attivazione del complesso dell'ossidasi NADPH è avviata dal legame, dipendente dalla fosforilazione, della subunità citosolica NCF1/p47-phox a CYBA/p22-phox, promuovendo l'assemblaggio sulla membrana plasmatica o sulla membrana fagosomiale.
• La proteina è localizzata nel citoplasma e trasloca sulle membrane in seguito all'attivazione.
• NCF2 è una fosfoproteina e contiene ripetizioni TPR e un dominio SH3, che mediano le interazioni proteina-proteina all'interno del complesso dell'ossidasi.
• Le mutazioni di NCF2 sono associate alla malattia granulomatosa cronica, un'immunodeficienza primaria caratterizzata da una produzione difettosa di superossido.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme e l'isoforma canonica ha un peso molecolare di circa 60 kDa.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato è una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 227–526 di NCF2 umano (NP_000424.2). In quanto anticorpo policlonale, può riconoscere molteplici epitopi e potenzialmente reagire crociatamente con isoforme o ortologhi.
• Per il Western blot (WB), la banda target attesa è intorno a 60 kDa; si consiglia di ottimizzare la preparazione del lisato e la diluizione dell'anticorpo per ottenere un rilevamento chiaro. Validare con controlli positivi e negativi appropriati.
• Nell'immunofluorescenza (IF-P), assicurarsi di eseguire una fissazione e una permeabilizzazione adeguate per rilevare NCF2 citoplasmatico e traslocato sulla membrana. Utilizzare linee cellulari o cellule primarie pertinenti.
• Per l'ELISA, determinare l'antigene di rivestimento ottimale e la titolazione dell'anticorpo per ottenere la sensibilità e la specificità desiderate.
• È riportata una reattività crociata con il topo; validare nel proprio sistema campione specifico se il prodotto viene utilizzato per modelli non umani.

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