Anticorpo policlonale Anti-NPC2 (HE1, EDDM1) per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P61916

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NPC2

• NPC2 (noto anche come HE1, EDDM1) è un trasportatore intracellulare di colesterolo che svolge un ruolo critico nell'efflusso del colesterolo dal compartimento lisosomiale.
• Agisce in concerto con NPC1; il colesterolo rilasciato dalle LDL nei endosomi tardivi/lisosomi viene trasferito da NPC2 alla tasca di legame del colesterolo di NPC1.
  Riferimenti correlati:
  PMID:17018531 PMID:18772377 PMID:27238017
• NPC2 lega il colesterolo con stechiometria 1:1 e può legare anche una varietà di altri steroli, inclusi gli steroli vegetali.
  Riferimenti correlati:
  PMID:17018531
• La forma secreta di NPC2 regola la secrezione biliare di colesterolo attraverso la stimolazione del trasporto mediato da ABCG5/ABCG8.
• A livello subcellulare, NPC2 si trova nel lisosoma, nel reticolo endoplasmatico ed è secreto.
• Viene rilevato in molteplici tessuti, inclusi la bile della cistifellea, i fibroblasti, il rene, il fegato, la milza, l'intestino tenue, la placenta, il testicolo e l'epididimo.
• La proteina contiene un peptide segnale e presenta modificazioni post-traduzionali come legami disolfuro, glicosilazione e acetilazione; le mutazioni in NPC2 sono collegate alla malattia di Niemann-Pick tipo C2.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è stato sviluppato contro una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 20–151 di NPC2 umano, che corrisponde alla proteina matura completa dopo la rimozione del peptide segnale. Questa progettazione può garantire il riconoscimento dell'NPC2 endogeno.
• Per il Western blotting, prevedere una banda a circa 17 kDa; validare l'anticorpo in lisati di controllo positivo (es. fibroblasti umani o tessuto renale) e considerare l'uso di un agente riducente data la presenza di legami disolfuro.
• Nelle applicazioni IHC-P o IF-P, includere appropriati passaggi di recupero dell'antigene e verificare la colorazione su sezioni tissutali note per esprimere NPC2 (come rene o testicolo).
• L'anticorpo presenta reattività crociata con NPC2 di topo e ratto; tuttavia, l'omologia di sequenza tra le specie dovrebbe essere verificata per epitopi specifici e l'anticorpo dovrebbe essere validato nel modello sperimentale pertinente.

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