Anticorpo policlonale di coniglio anti-NPHP4 per WB, IF/ICC, ELISA - O75161

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione della nefrocistina-4

• La nefrocistina-4 (nota anche come nefroretinina) è codificata dal gene NPHP4; attraverso lo splicing alternativo vengono prodotte molteplici isoforme.
• Coinvolta nell'organizzazione delle giunzioni apicali e nella funzione ciliare; si ipotizza che operi all'interno di un modulo NPHP1-4-8. È necessaria per la costruzione di ciglia funzionali e contribuisce a organizzare la rete di actina subapicale nelle cellule epiteliali multiciliate. Riferimenti correlati: PMID:19755384 PMID:21565611
• Collabora con INVS per regolare negativamente la via canonica Wnt e promuovere la via Wnt-PCP regolando le proteine disheveled. Stabilizza JADE1 e ne promuove la traslocazione nucleare, portando all'inibizione cooperativa della segnalazione Wnt canonica. Riferimenti correlati: PMID:21498478 PMID:22654112
• Agisce come regolatore negativo della via Hippo associandosi a LATS1 e modulando la fosforilazione e la localizzazione di WWTR1/TAZ dipendenti da LATS1. Riferimenti correlati: PMID:21555462
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma, il corpo basale delle ciglia, il centrosoma, le giunzioni serrate e il nucleo, coerentemente con i suoi ruoli nelle funzioni ciliari e giunzionali.
• Espressa prevalentemente nel rene, nel muscolo scheletrico, nel cuore e nel fegato; un'espressione inferiore si riscontra nel cervello e nei polmoni.
• Fosforilata nelle cellule, il che può influenzare le sue attività di segnalazione. Le mutazioni in NPHP4 sono associate alla nefronoftisi, alla sindrome di Senior-Loken e all'amaurosi congenita di Leber, sottolineando il suo significato clinico.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione C-terminale (amminoacidi 1247–1426). Verificare la reattività quando si lavora con isoforme o varianti di splicing che potrebbero differire in questo dominio.
• Validato per Western blot (WB), immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC) ed ELISA con campioni umani, di topo e di ratto. Se si utilizzano altre specie, eseguire un esperimento pilota di reattività crociata.
• Per il WB, il peso molecolare previsto è di ~158 kDa; utilizzare un gel di acrilammide a bassa percentuale e tempi di trasferimento prolungati per garantire una buona risoluzione e il trasferimento di proteine ad alto peso molecolare.
• Nell'IF/ICC, la localizzazione target include ciglia e giunzioni serrate. Ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per preservare queste strutture e l'accessibilità dell'epitopo.

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