Anticorpo policlonale coniglio anti-NPRL2 per WB, IF/ICC, ELISA - Q8WTW4

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NPRL2

• NPRL2 (conosciuto anche come NPR2, NPR2L, TUSC4, FFEVF2) è una componente catalitica del complesso GATOR1, che agisce come inibitore della branca di sensing degli amminoacidi della via di mTORC1. Riferimenti bibliografici: PMID:23723238, PMID:29590090, PMID:35338845
• In caso di deprivazione di amminoacidi, GATOR1 agisce come proteina GTPase-activating (GAP) per RagA/RRAGA o RagB/RRAGB, convertendoli nello stato inattivo legato al GDP, determinando il rilascio di mTORC1 dai lisosomi e l'inibizione della via. Riferimenti bibliografici: PMID:23723238, PMID:29590090, PMID:35338845
• Quando gli amminoacidi sono abbondanti, GATOR2 ubiquitina e inibisce GATOR1, consentendo l'attivazione di mTORC1; inoltre, PRMT1 metila NPRL2 in condizioni di sufficiente metionina, inibendo la sua attività GAP. Riferimenti bibliografici: PMID:23723238, PMID:36528027, PMID:27173016, PMID:30651352, PMID:35338845
• NPRL2 funziona come soppressore tumorale sopprimendo la fosforilazione della tirosina dipendente da Src e l'attivazione di PDPK1 e la sua segnalazione a valle, inibendo quindi la crescita cellulare e aumentando la sensibilità ai farmaci antitumorali. Riferimenti bibliografici: PMID:18616680
• Subcellulare, NPRL2 si localizza sulla membrana del lisosoma, dove esercita il suo ruolo regolatorio nella segnalazione di mTORC1.
• L'espressione tissutale è massima nel muscolo scheletrico, seguita da cervello, fegato e pancreas, con livelli più bassi in polmone, rene, placenta e cuore; è espresso anche in varie regioni cerebrali e nella maggior parte delle linee cellulari di cancro del polmone. Riferimenti bibliografici: PMID:26505888, PMID:27173016
• NPRL2 è associato a varianti patologiche correlate all'epilessia ed è soggetto a splicing alternativo e modifiche post-traduzionali tra cui metilazione e ubiquitinazione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno utilizzato è una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 1–220 di NPRL2 umano (NP_006536.3). Questa regione N-terminale può essere adatta per rilevare NPRL2 full-length in tutte le specie.
• Le applicazioni validate includono Western blot (WB), immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC) e ELISA. È stata riportata reattività crociata con campioni di uomo, topo e ratto; si consiglia di eseguire una validazione specifica per la specie nel proprio sistema sperimentale.
• Per il WB è prevista una banda a circa 44 kDa. A causa della natura policlonale, si possono osservare bande aspecifiche aggiuntive; si raccomanda l'ottimizzazione del blocco e della diluizione dell'anticorpo.
• Quando si utilizza IF/ICC, è necessario testare metodi adeguati di fissazione e permeabilizzazione, poiché NPRL2 si localizza sulle membrane lisosomiali.

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