Anticorpo policlonale di coniglio Anti-NPSR1 per WB e ELISA - Q6W5P4

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NPSR1

• NPSR1 codifica il recettore della neuropeptide S, noto anche come recettore accoppiato a proteina G 154 (GPR154), GPRA o PGR14, un tipico GPCR a sette domini transmembrana.
• L'attivazione del recettore da parte della neuropeptide S (NPS) avvia una doppia via di segnalazione: l'attivazione della fosfolipasi C dipendente da Gq mobilita il Ca²⁺ intracellulare, mentre la stimolazione dipendente da Gs aumenta i livelli di cAMP (PubMed:15312648, PubMed:15947423, PubMed:16720571, PubMed:26865629). Riferimenti correlati: PMID:15312648 PMID:15947423 PMID:16720571 PMID:26865629
• Entrambe le vie del Ca²⁺ e del cAMP convergono sulla fosforilazione di ERK1/2 e il legame di NPS inibisce infine la crescita cellulare (PubMed:15947423, PubMed:26865629). Riferimenti correlati: PMID:15947423 PMID:26865629
• Lo splicing alternativo di NPSR1 genera più isoforme con profili di espressione distinti: l'isoforma 1 è predominante nella muscolatura liscia, mentre l'isoforma 4 è ubiquitaria nei tessuti epiteliali, tra cui bronchi, stomaco, intestino e utero (PubMed:15947423). Riferimenti correlati: PMID:15947423
• Subcellularmente, NPSR1 si trova sulla membrana cellulare e può cicizzare verso il citoplasma, una caratteristica comune dei GPCR attivati.
• L'espressione di NPSR1 è significativamente upregolata nella muscolatura liscia bronchiale e nell'epitelio dei pazienti con asma, collegando questo recettore alla fisiopatologia dell'asma (PubMed:15947423). Riferimenti correlati: PMID:15947423
• Le modifiche post-traduzionali chiave includono la glicosilazione N-linked e i legami disolfuro conservati, critici per il ripiegamento del recettore e il legame con il ligando.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente alla regione C-terminale (aa 200–C-terminale) dell'isoforma 1 di NPSR1 umano (NP_001287863.1). Questa regione è intracellulare e può essere conservata tra le varianti di splicing; verificare la reattività con l'isoforma specifica di vostro interesse.
• Per il Western blotting, è attesa una banda intorno ai 43 kDa per il recettore full-length, ma la glicosilazione o la dimerizzazione possono produrre specie di peso molecolare maggiore. Convalidare la specificità dell'anticorpo in modelli cellulari con sovraespressione di NPSR1 rispetto a modelli con silenziamento/knockout.
• Nelle applicazioni ELISA, può essere adatto il rivestimento diretto del peptide immunogeno o del dominio extracellulare ricombinante di NPSR1. Ottimizzare le condizioni di rivestimento e includere controlli negativi.
• Dato l'espressione del recettore nella muscolatura liscia e nell'epitelio, per i test iniziali si consiglia di utilizzare lisati da cellule della muscolatura liscia bronchiale, colon o utero.
• Poiché NPSR1 è un GPCR, si raccomandano protocolli di estrazione delle proteine di membrana per una rilevazione ottimale tramite WB.

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