Anticorpo policlonale coniglio anti-NQO1 per WB, IF/ICC, ELISA - P15559

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della NAD(P)H deidrogenasi [chinone] 1 (NQO1)

• NQO1 (NAD(P)H deidrogenasi [chinone] 1) è un enzima contenente flavina che catalizza la riduzione a due elettroni dei chinoni a idrochinoni, utilizzando NADH o NADPH come donatori di elettroni. Gli elettroni vengono trasferiti sequenzialmente da NAD(P)H al cofattore flavina e poi dal flavina ridotto al chinone, bypassando la formazione di semichinoni e specie reattive dell'ossigeno. Riferimenti correlati: PMID:8999809 PMID:9271353

• L'enzima svolge un ruolo centrale nella regolazione redox cellulare disintossicando i chinoni e riducendo componenti del sistema redox della membrana plasmatica, come il coenzima Q e le vitamine chinoniche, per produrre forme antiossidanti di idrochinone. Può funzionare come scavenger del superossido per prevenire l'ossidazione dell'idrochinone e facilitare l'escrezione. Riferimenti correlati: PMID:15102952 PMID:8999809 PMID:9271353

• NQO1 può anche attivare certi chinoni e i loro derivati, generando idrochinoni redox-reattivi con potenziali attività di cross-linking del DNA e antitumorali. Riferimenti correlati: PMID:8999809

• In caso di stress ossidativo, NQO1 interagisce con i soppressori tumorali TP53 e TP73 in modo dipendente dal NADH, inibendo la loro degradazione indipendente dall'ubiquitina da parte del proteasoma 20S. Riferimenti correlati: PMID:15687255 PMID:28291250

• La proteina è localizzata nel citoplasma e nel citosol.

• NQO1 è una fosfoproteina soggetta a modifiche post-traduzionali, inclusa la fosforilazione, la formazione di legami isopeptidici e la coniugazione simile all'ubiquitina, che possono regolare la sua attività e stabilità.

• Lo splicing alternativo del gene NQO1 genera varianti di trascritt multiple, potenzialmente dando origine a diverse isoforme proteiche.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre la sequenza completa di NQO1 umano (amminoacidi 1–274), quindi l'anticorpo può riconoscere sia le forme native che quelle denaturate della proteina in applicazioni come WB, IF/ICC ed ELISA.
• Per la WB, considerare l'utilizzo di un gel denaturante riducente standard e convalidare la banda rilevata a circa 31 kDa utilizzando un lisato cellulare o tissutale pertinente noto per esprimere NQO1 (es. fegato, rene o linee cellulari tumorali).
• Nell'IF/ICC, includere appropriati passaggi di permeabilizzazione e fissaggio per garantire l'accesso al bersaglio citosolico; una colorazione nucleare di contrasto può aiutare a visualizzare la localizzazione.
• Titolare l'anticorpo per ogni applicazione e sistema biologico, e includere appropriati controlli positivi e negativi per confermare la specificità, specialmente data la potenziale presenza di isoforme multiple.

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