Anticorpo policlonale anti-NRP2 per WB, IF/ICC, ELISA - O60462

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Neuropilina-2

• La Neuropilina-2 (NRP2), nota anche come VEGF165R2, è una proteina transmembrana a passaggio singolo che appartiene alla famiglia delle neuropiline. Condivide caratteristiche strutturali con NRP1, inclusi i domini extracellulari CUB e del fattore di coagulazione, una breve regione transmembrana e una coda citoplasmatica.
• La NRP2 funziona come recettore ad alta affinità per le semaforine di classe 3 (es. SEMA3C e SEMA3F) e per isoforme specifiche del fattore di crescita dell'endotelio vascolare (VEGF-165 e VEGF-145), nonché per l'isoforma PLGF-2 del fattore di crescita placentare. Queste interazioni regolano diversi processi cellulari come la guida degli assoni, l'angiogenesi e la linfangiogenesi.
• Oltre al suo ruolo nello sviluppo normale, la NRP2 agisce come recettore per l'ingresso dipendente da pentamero del citomegalovirus umano (HCMV) nelle cellule epiteliali ed endoteliali, evidenziando il suo coinvolgimento nelle interazioni ospite-virus.
• A livello subcellulare, la NRP2 è localizzata sulla membrana plasmatica come proteina transmembrana, ma può anche essere rilasciata come isoforma secreta attraverso splicing alternativo, consentendo funzioni non cellula-autonome.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione N-legata, formazione di ponti disolfuro, legame del calcio e legame dell'eparina, tutti i quali modulano la sua stabilità, il riconoscimento dei ligandi e la segnalazione.
• In coerenza con la sua multifunzionalità, la NRP2 è implicata nella neurogenesi, nella differenziazione dello sviluppo e nei processi patologici come l'angiogenesi tumorale e l'evasione immunitaria.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione extracellulare (amminoacidi 21–219) della NRP2 umana, suggerendo che l'anticorpo probabilmente si rivolge a un epitopo all'interno del dominio di legame del ligando. Ciò potrebbe consentire il rilevamento di entrambe le forme legate alla membrana e secrete in condizioni non riducenti.
• Per il Western blot, è prevista una banda specifica intorno a 105 kDa. Assicurarsi di una preparazione appropriata del campione e considerare l'uso di una cocktail di inibitori delle proteasi per evitare la degradazione.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), è previsto un segnale localizzato sulla membrana. I passaggi di permeabilizzazione possono influenzare i pattern di colorazione per i pool intracellulari; convalidare con i rispettivi controlli.
• Le prestazioni ELISA sono state verificate; tuttavia, le condizioni di rivestimento ottimali e le strategie di rilevamento dovrebbero essere determinate empiricamente per ogni formato di saggio.
• La reattività crociata con la NRP2 di mouse e ratto consente studi traslazionali, ma le variazioni della sequenza specifiche della specie possono influenzare l'affinità. Convalidare nel sistema di campione pertinente prima di esperimenti su larga scala.

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