Anticorpo monoclonale Anti-NUDT5 per WB, IF/ICC, ELISA - Q9UKK9

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NUDT5

• NUDT5 è un enzima a doppia funzione: in assenza di difosfato agisce come ADP-zucchero pirofosfatasi, idrolizzando diversi difosfati di nucleoside modificati; in presenza di difosfato catalizza la sintesi di ATP. Riferimenti correlati: PMID:27257257
• In qualità di ADP-zucchero pirofosfatasi, NUDT5 idrolizza substrati come ADP-ribosio, ADP-mannosio, ADP-glucosio, 8-osso-GDP e 8-osso-dGDP con efficienza simile. Riferimenti correlati: PMID:10567213, PMID:10722730, PMID:17052728
• Nel nucleo, NUDT5 media la sintesi di ATP convertendo l'ADP-ribosio in ATP e ribosio 5-fosfato, una reazione che dipende dalla sua defosforilazione nel sito Thr-45. Riferimenti correlati: PMID:27257257
• La generazione di ATP nucleare da parte di NUDT5 è fondamentale per gli eventi di rimodellamento della cromatina che consumano energia. Riferimenti correlati: PMID:27257257
• NUDT5 mostra attività di decapping in vitro su RNA cappato con UDP-GlcNAc, tagliando il ponte di pirofosfato del cappuccio zuccherino. Riferimenti correlati: PMID:38716860
• NUDT5 lega l'snoRNA U8 ma non esegue il suo decapping, suggerendo un ruolo nel metabolismo dell'RNA che va oltre le sue attività enzimatiche.
• La proteina si localizza nel nucleo ed è ampiamente espressa, con livelli massimi nel fegato.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Poiché l'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1–100), ci si aspetta che l'anticorpo riconosca NUDT5 a lunghezza intera e potenzialmente qualsiasi isoforma che contiene questa regione; validare sempre nel proprio sistema cellulare o tissutale.
• Per il Western blot, una diluizione iniziale di 1:1000 è comunemente utilizzata per gli anticorpi monoclonali, ma si consiglia l'ottimizzazione tramite una serie di diluizioni.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, è richiesta la permeabilizzazione con Triton X-100 o un detergente simile per accedere a NUDT5 nucleare; la fissazione con metanolo può anche aiutare a preservare l'antigenicità.
• La pre-adsorbimento con il peptide immunizzante può essere utilizzato come controllo di specificità sia in WB che in IF/ICC.
• La reattività crociata con topo e ratto è stata riportata; tuttavia, l'allineamento della sequenza della regione N-terminale può aiutare a predire la reattività con altre specie.
• Per l'ELISA si suggerisce un rivestimento diretto dell'antigene e una titolazione dell'anticorpo; prendere in considerazione l'uso di proteina NUDT5 ricombinante per le curve di calibrazione.

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