Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-NUMA1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14980

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NUMA1

• La Proteina 1 dell'Apparato Mitotico Nucleare (NUMA1), nota anche come NuMA, NMP-22 o antigene SP-H, è una grande proteina a spirale avvolta (coiled-coil) di 238 kDa codificata dal gene NUMA1. È un componente principale della matrice nucleare.
• NUMA1 svolge un ruolo critico nella formazione e nel mantenimento dei poli del fuso durante la mitosi, ancorando le estremità meno dei microtubuli, garantendo così un corretto allineamento e segregazione cromosomica.
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• Svolge funzioni nell'orientamento e nell'allungamento del fuso mitotico attraverso meccanismi dipendenti da dineina-dinactina, interagendo con complessi corticali contenenti proteine GPSM2 e Gα, nonché fosfoinositidi come PI(4,5)P2.
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• NUMA1 è anche necessario per l'assemblaggio dell'aster microtubulare mitotico e la formazione del fuso anastrale, regolando positivamente la localizzazione di TNKS ai poli del fuso.
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• Oltre alla mitosi, NUMA1 è una proteina altamente abbondante della matrice nucleare che occupa la maggior parte del volume nucleare, suggerendo un ruolo strutturale. È essenziale per la differenziazione epidermica e la morfogenesi del follicolo pilifero.
• La localizzazione subcellulare include il nucleo, il nucleoplasma, la matrice nucleare, i poli del fuso, i centrosomi, la corteccia cellulare e la membrana cellulare laterale, riflettendo i suoi ruoli dinamici sia nell'interfase che nella mitosi.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, ADP-ribosilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, come annotato in UniProt (legame isopeptidico, coniugazione Ubl, glicoproteina, lipoproteina), che possono regolare le sue funzioni.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Dato l'elevato peso molecolare di NUMA1 (circa 238 kDa), per il Western blotting, considerare l'uso di un gel di poliacrilamide a bassa percentuale (ad es. 6–8%) e tempi di trasferimento prolungati per garantire un trasferimento efficiente.
• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1–309) di NUMA1 umano; verificare che questa regione non sia occlusa da modifiche post-traduzionali o partner di legame nei vostri campioni.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), NUMA1 mostra localizzazione nucleare nelle cellule in interfase e localizzazione ai poli del fuso nelle cellule mitotiche; ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per preservare l'antigenicità.
• Nell'immunoistochimica (IHC), potrebbero essere necessari metodi di recupero dell'antigene per tessuti fissati in formalina e inclusi in paraffina; validare i pattern di colorazione rispetto alle localizzazioni subcellulari note.
• Essendo un anticorpo policlonale, può verificarsi una variabilità da lotto a lotto; includere appropriati controlli positivi e negativi in ogni esperimento.

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