Anticorpo policlonale Anti-NUP98 per WB, IF/ICC, ELISA - P52948

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NUP98

• NUP98, noto anche come ADIR2, NUP96, NUP196 o Nup98-96, è un componente del complesso nucleare poro (NPC) e viene sintetizzato come proteina precursore che subisce una scissione autocatalitica per generare NUP98 e NUP96, entrambi integrali per la funzione della NPC.
• Svolge un ruolo critico nell'assemblaggio e nel mantenimento della NPC, e sia NUP98 che NUP96 sono necessari per il trasporto nucleocitoplasmatico bidirezionale. Riferimenti correlati: PMID:33097660
• In collaborazione con DHX9, NUP98 partecipa alla regolazione della trascrizione e allo splicing alternativo di geni specifici, ed è coinvolto nel processo di localizzazione di DHX9 in foccoli intranucleari discreti noti corpi GLFG. Riferimenti correlati: PMID:28221134
• La proteina si localizza sulla membrana nucleare e si trova prevalentemente nel complesso nucleare poro, con una presenza aggiuntiva nel nucleoplasma.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione, formazione di legami isopeptidici e coniugazione simile all'ubiquitina, che possono regolarne la funzione e le interazioni.
• NUP98 interagisce con la proteina capsidica P24 e la proteina nucleocapsidica P7 dell'HIV-1, facilitando potenzialmente l'integrazione virale nel nucleo ospite, con una affinità di legame ridotta osservata per alcune mutazioni della capside. Riferimenti correlati: PMID:23523133
• La proteina presenta domini ripetuti FG/GLFG che fungono da siti di legame per i recettori di trasporto, consentendo il passaggio selettivo delle macromolecole attraverso la NPC.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione della porzione NUP98 (aa 621-920) del precursore full-length di NUP98, quindi l'anticorpo rileva principalmente la forma scissa di NUP98, ma può anche riconoscere il precursore a causa della sovrapposizione di sequenza.
• Per il Western blotting, si può osservare una banda intorno a 98 kDa (NUP98 scisso) o 198 kDa (precursore) a seconda della preparazione del campione e delle condizioni di elettroforesi; convalidare utilizzando estratti nucleari di cellule umane o murine.
• Per immunofluorescenza/ICC, aspettarsi una colorazione puntiforme del bordo nucleare caratteristica dei complessi nucleari poro; la permeabilizzazione è necessaria per l'accesso dell'anticorpo.
• Le applicazioni ELISA possono essere utilizzate per quantificare i livelli di NUP98 in lisati cellulari o frazioni purificate; ottimizzare empiricamente le condizioni di rivestimento e rilevazione.

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