Anticorpo policlonale coniglio anti-NYX per WB, IHC-P, ELISA - Q9GZU5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NYX

• La nictalopina (NYX) è un proteoglicano secreto con un peso molecolare previsto di circa 51,5 kDa (UniProt: Q9GZU5).
• La proteina appartiene alla famiglia dei proteoglicani a ripetizioni ricche di leucina (SLRP), caratterizzati da motivi a ripetizione ricca di leucina (LRR).
• NYX svolge un ruolo fondamentale nella vista mediando la depolarizzazione indotta dalla luce delle cellule bipolari ON retiniche, agendo probabilmente come impalcatura per le proteine TRPM1 e GRM6.
• È essenziale per il corretto traffico di TRPM1 verso le estremità dendritiche delle cellule bipolari ON, facilitando così la trasduzione del segnale alla sinapsi fotorecettore-bipolare.
• Subcellolarmente, NYX è localizzata nella matrice extracellulare, nei dendriti e nelle regioni postsinaptiche, ed è secreta nello spazio extracellulare.
• L'espressione tissutale è prominente nella retina (segmento interno dei fotorecettori, strati nucleari esterno e interno, strato delle cellule gangliari) e nel rene, con livelli più bassi nel cervello, nel testicolo e nel muscolo.
• Le mutazioni del gene NYX sono associate alla cecità notturna stazionaria congenita (CSNB), una patologia retinica ereditaria caratterizzata da una ridotta capacità di visione notturna.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione e formazione di proteoglicani, coerenti con la sua funzione nella matrice extracellulare.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un frammento della regione C-terminale della NYX umana (aa 282-481), che contiene diverse ripetizioni ricche di leucina. Questo design può conferire specificità per il bersaglio; tuttavia, la reattività incrociata deve essere convalidata nel sistema di campione corrispondente.
• Per il Western blotting è attesa una banda intorno ai 52 kDa. Si consiglia di includere controlli positivi (ad esempio lisati retinici) e utilizzare condizioni appropriate di bloccaggio e lavaggio per ridurre al minimo il fondo.
• Nell'immunoistochimica (sezioni di paraffina), può essere necessario un recupero dell'antigene per una rilevazione ottimale. Eseguire il test su sezioni di tessuto retinico umano o di topo, dove NYX è espressa nei segmenti interni e negli strati nucleari.
• Per le applicazioni ELISA, considerare l'utilizzo della proteina ricombinante come antigene di rivestimento e titolare sia l'anticorpo di rivestimento che quello di rilevazione per ottenere una risposta dose-risposta lineare.
• A causa della natura policlonale dell'anticorpo, questo può rilevare più epitopi; pertanto, la specificità deve essere confermata utilizzando modelli knockout o knockdown, se disponibili.

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