Anticorpo monoclonale anti-OGT per WB, ELISA, ChIP - O15294

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di OGT

• L'OGT (UDP-N-acetilglucosammina--peptide N-acetilglucosaminiltransferasi subunità da 110 kDa) è la subunità catalitica del complesso O-GlcNAc transferasi, responsabile dell'aggiunta di una singola N-acetilglucosammina (O-GlcNAc) ai residui di serina/treonina delle proteine nucleari e citoplasmatiche (PubMed:12150998, PubMed:15361863, PubMed:19451179). Riferimenti correlati: PMID:12150998, PMID:15361863, PMID:19451179
• Glicosila una vasta gamma di substrati, tra cui l'istone H2B, AKT1, AMPK, EZH2, MAPT/TAU e molti altri, regolando così processi chiave come la trascrizione, la segnalazione dell'insulina, l'autofagia e i ritmi circadiani (PubMed:19451179, PubMed:20200153, PubMed:21285374). Riferimenti correlati: PMID:19451179, PMID:20200153, PMID:21285374
• L'OGT esiste in molteplici isoforme, inclusa un'isoforma mitocondriale (mOGT) che è citotossica e promuove l'apoptosi, in particolare nelle cellule di insulinoma. Possiede inoltre una specifica attività N-acetilglucosaminiltransferasica con una distinta preferenza per il substrato (PubMed:31527085). Riferimenti correlati: PMID:31527085
• L'enzima si localizza nel nucleo, nel citoplasma, nei mitocondri e nella membrana cellulare, riflettendo i suoi diversi ruoli funzionali.
• Le modifiche post-traduzionali dell'OGT includono l'acetilazione e la fosforilazione, e partecipa ai percorsi di coniugazione dell'ubiquitina. Le parole chiave evidenziano anche il suo coinvolgimento nell'apoptosi, nei ritmi biologici, nella regolazione della cromatina e nelle interazioni ospite-virus.
• L'OGT è altamente espresso nel pancreas, con livelli moderati nel muscolo scheletrico, nel cuore, nel cervello e nella placenta, e tracce nei polmoni e nel fegato, in linea con il suo ruolo nella segnalazione dell'insulina e nell'omeostasi del glucosio.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Il peptide immunogeno corrisponde ai residui 947–1046 dell'OGT umano, una regione probabilmente esposta nella proteina nativa; si consiglia di utilizzare questo anticorpo per il Western Blot denaturante dove l'epitopo è accessibile.
• Per i saggi ChIP, validare le condizioni di cross-linking e la specificità dell'anticorpo con appropriati controlli positivi e negativi, data l'associazione dell'OGT con la cromatina.
• Nel Western Blot, il peso molecolare previsto è di circa 117 kDa; tuttavia, molteplici isoforme ed estese modifiche post-traduzionali possono portare a bande aggiuntive o spostamenti; includere marcatori di peso molecolare adeguati.
• Quando si lavora con campioni di roditori, confermare la reattività nei tessuti di topo o ratto, poiché l'anticorpo mostra cross-reattività; si raccomanda l'ottimizzazione della diluizione e delle condizioni di blocco.

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