Anticorpo policlonale di coniglio Anti-Orexin B/Ipocretina-2 per WB, ELISA - O43612

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Orexin B/Ipocretina-2

• Il precursore delle neuropeptidi ipocretine (prepro-orexina) viene processato in due neuropeptidi maturi: orexina-A (ipocretina-1) e orexina-B (ipocretina-2), che condividono omologia di sequenza ma presentano profili di legame recettoriale distinti.
• Orexin B/Ipocretina-2 si lega specificamente al recettore dell'orexina HCRTR2/OX2R e svolge ruoli chiave nella regolazione centrale del comportamento alimentare, dell'omeostasi energetica e dei cicli sonno-veglia.
• I neuroni orexinergici sono localizzati principalmente nell'ipotalamo laterale; a livello subcellulare, il precursore si localizza nel reticolo endoplasmatico ruvido, nelle vescicole citoplasmatiche e nelle sinapsi.
• Orexin B/Ipocretina-2 partecipa alla modulazione della secrezione dell'ormone luteinizzante pituitario in modo dipendente dagli steroidi ovarici, suggerendo un ruolo nella funzione riproduttiva neuroendocrina.
• Il precursore contiene un peptide segnale, subisce la scissione su coppie di residui basici e presenta modificazioni post-traduzionali tra cui l'amidazione e la formazione di acido pirrolidone carbossilico, che sono critiche per la bioattività.
• Un'espressione abbondante viene rilevata nel nucleo subtalamico, mentre altre regioni cerebrali e tessuti periferici non mostrano espressione rilevabile (l'ipotalamo non è stato testato).

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico della regione N-terminale (aa 1-100) di Orexin B/Ipocretina-2 umana. L'anticorpo può riconoscere sia il precursore che il peptide maturo a seconda della preparazione e della lavorazione del campione.
• Per Western blot (WB), considerare il peso molecolare previsto del precursore di ~13 kDa e il peptide maturo di orexina-B più piccolo; validare la rilevazione utilizzando controlli positivi appropriati come lisati di tessuto cerebrale o proteina ricombinante.
• In ELISA, valutare il rivestimento diretto con peptide o formati sandwich; valutare la potenziale reattività crociata con l'orexina-A a causa della similarità di sequenza nella regione dell'immunogeno.
• Includere controlli positivi e negativi appropriati e ottimizzare empiricamente i fattori di diluizione per ogni applicazione.

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