Anticorpo policlonale coniglio anti-OTUD4 per WB, IF/ICC, ELISA - Q01804

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'OTUD4

• OTUD4, noto anche come proteina indotta dall'HIV-1 HIN-1, è una deubiquitinasi che idrolizza il legame isopeptidico tra l'ubiquitina e i residui di lisina sulle proteine bersaglio (PubMed:23827681, PubMed:25944111, PubMed:29395066).
  Riferimenti correlati: PMID:23827681 PMID:25944111 PMID:29395066
• Dopo la fosforilazione a Ser-202 e Ser-204, OTUD4 deubiquitina specificamente la proteina adattatrice MYD88 poliubiquitinata Lys-63 tramite i pathway del recettore IL-1 e del recettore Toll-like, attenuando la trascrizione infiammatoria dipendente da NF-kB (PubMed:29395066).
  Riferimenti correlati: PMID:29395066
• Indipendentemente dalla sua attività catalitica, OTUD4 funge da ponte per assemblare le deubiquitinasi USP7 e USP9X, stabilizzando l'enzima di riparazione dell'alchilazione ALKBH3 e promuovendo la riparazione delle lesioni del DNA alchilato (PubMed:25944111).
  Riferimenti correlati: PMID:25944111
• La proteina si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, coerentemente con i suoi ruoli nella segnalazione immunitaria e nella riparazione del DNA.
• OTUD4 subisce modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione (almeno a Ser-202/Ser-204) e acetilazione, ed è soggetta a splicing alternativo.
• La proteina a lunghezza intera ha un peso molecolare calcolato di circa 124 kDa (UniProt Q01804).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 200-500 dell'OTUD4 umano, una regione centrale che può rilevare l'OTUD4 endogeno in più formati applicativi.
• Per il Western blotting, la proteina OTUD4 a lunghezza intera migra a circa 124 kDa; si consiglia un gel SDS-PAGE al 6-8% e condizioni di trasferimento adeguate.
• Per l'immunofluorescenza/ICC, OTUD4 mostra sia localizzazione citoplasmatica che nucleare; le condizioni di permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzate per rilevare i pool nucleari.
• Gli esperimenti ELISA possono essere eseguiti utilizzando l'immunogeno ricombinante o lisati cellulari; considerare la convalida con un controllo positivo noto.
• È prevista la reattività crociata con OTUD4 umano, murino e di ratto in base all'omologia di sequenza; tuttavia, le prestazioni in ogni specie devono essere confermate sperimentalmente.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti deve essere verificata ed è consigliabile includere controlli positivi e negativi appropriati in tutti gli saggi.

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