Anticorpo policlonale di coniglio anti-OX40L per WB, IF/ICC, ELISA - P23510

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di OX40L (TNFSF4)

• OX40L, noto anche come TNFSF4, CD252 e glicoproteina Gp34, è un membro della superfamiglia dei ligandi del fattore di necrosi tumorale (TNF) e svolge il ruolo di molecola co-stimolatoria chiave nelle risposte immunitarie.
• Codifica una proteina transmembrana di tipo II espressa principalmente sulle cellule presentanti l'antigene (APC) attivate, incluse cellule B, cellule dendritiche e macrofagi.
• OX40L si lega specificamente al suo recettore, TNFRSF4 (OX40), sulle cellule T attivate, attivando segnali co-stimolatori che potenziano la proliferazione, la sopravvivenza e la produzione di citochine effettrici delle cellule T.
• La proteina è localizzata sulla membrana cellulare tramite una sequenza segnale-ancora N-terminale, con il dominio di omologia TNF C-terminale rivolto verso lo spazio extracellulare, consentendo la trimerizzazione e il legame al recettore.
• Le modifiche post-traduzionali, inclusi la glicosilazione e la formazione di ponti disolfuro, sono fondamentali per la stabilità strutturale e l'attività biologica.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme e i polimorfismi genetici nel gene TNFSF4 sono stati associati alla suscettibilità al lupus eritematoso sistemico (LES) e ad altre patologie autoimmuni.
• Il dominio extracellulare (approssimativamente gli amminoacidi 51-183) utilizzato per l'immunizzazione corrisponde alla regione di legame al recettore, garantendo che l'anticorpo abbia come bersaglio la parte funzionale della molecola.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende il dominio extracellulare previsto (aa 51-183), pertanto l'anticorpo dovrebbe riconoscere sia la forma legata alla membrana sia eventuali frammenti solubili rilasciati di OX40L.
• Per il Western blot, il peso molecolare teorico è di circa 21 kDa; tuttavia, la glicosilazione può causare uno spostamento della migrazione. Si raccomandano condizioni riducenti; validare con controlli positivi appropriati.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, potrebbe essere necessario ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione, poiché l'epitopo è extracellulare ma potrebbe essere influenzato dalla reticolazione. Testare sia condizioni permeabilizzate sia non permeabilizzate.
• La reattività crociata segnalata con OX40L murino consente l'uso in modelli murini; verificare le prestazioni nel proprio specifico sistema sperimentale.
• Per le applicazioni ELISA, considerare l'abbinamento di questo anticorpo policlonale con un partner appropriato per la cattura/rilevazione, al fine di realizzare un robusto saggio sandwich.

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