Anticorpo monoclonale di coniglio anti-p150 CAF1 per WB, ELISA - Q13111

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di p150 CAF1 (CHAF1A)

• p150 CAF1, noto anche come subunità A del fattore 1 di assemblaggio della cromatina (CHAF1A), è un componente fondamentale del complesso del fattore 1 di assemblaggio della cromatina (CAF-1).
• CAF-1 agisce come chaperone degli istoni, facilitando il deposito degli istoni H3 e H4 appena sintetizzati sul DNA in replicazione durante la fase S, un passaggio critico nell'assemblaggio dei nucleosomi.
• CAF-1 opera anche durante la riparazione del DNA, garantendo il corretto ripristino della struttura della cromatina dopo il danno al DNA.
• La proteina svolge un ruolo nel mantenimento dell'eterocromatina nelle cellule proliferanti, indirizzando le proteine CBX appena sintetizzate verso i foci di replicazione eterocromatici.
• CHAF1A è localizzata esclusivamente nel nucleo, in accordo con il suo ruolo nella replicazione del DNA e nella dinamica della cromatina.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione; inoltre, la proteina è soggetta a splicing alternativo e ubiquitinazione, come indicato dalle parole chiave di UniProt.
• Il peso molecolare previsto è di circa 107 kDa (106.910 Da), in accordo con il peso proteico osservato di circa 107 kDa.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot (WB), si raccomanda una condizione di denaturazione ridotta, dato il peso molecolare previsto di circa 107 kDa; è opportuno includere lisati di controllo positivo provenienti da linee cellulari umane (ad es. HeLa, HEK293).
• L'immunogeno (un peptide sintetico compreso tra gli amminoacidi 100–200) può influenzare le prestazioni dell'anticorpo; si consiglia di eseguire un saggio di competizione con peptide per confermare la specificità.
• Per l'ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento e blocco utilizzando p150 CAF1 ricombinante purificato o lisati cellulari; la reattività specifica per l'uomo deve essere validata.
• Poiché l'espressione di CAF-1 dipende dal ciclo cellulare, si consiglia di sincronizzare le cellule per arricchirle nella fase S durante l'esecuzione dei saggi.

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