Anticorpo monoclonale coniglio anti-p38 MAPK (validato KO) per WB, ELISA - Q16539

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di p38 MAPK (MAPK14)

• MAPK14 è una chinasi serina/treonina e unembro della famiglia delle chinasi p38 MAP. È nota anche come p38 alfa, CSBP, SAPK2A e possiede isoforme MXI2 ed EXIP. La proteina subisce fosforilazione e acetilazione ed è coinvolta nelle risposte allo stress, nell'infiammazione, nell'apoptosi e nella regolazione trascrizionale.

• Come componente centrale della via delle chinasi MAP, p38 MAPK è attivata da stimoli extracellulari come citochine pro-infiammatorie e stress fisico. Si stima che fosforili 200–300 substrati, orchestrando ampie risposte cellulari.

• Le chinasi a valle MSK1 (RPS6KA5) e MSK2 (RPS6KA4) sono attivate direttamente da p38 MAPK e fosforilano i fattori di trascrizione CREB1, ATF1, NF-kappa-B RELA, STAT1/3, nonché l'istone H3 e HMGN1, facilitando l'induzione rapida di geni immediate-early e il rimodellamento della cromatina. Riferimenti correlati: PMID:9687510 PMID:9792677

• Regola l'espressione genica post-trascrizionalmente tramite MK2 (MAPKAPK2) e MK3 (MAPKAPK3), che fosforilano proteine leganti l'mRNA come ZFP36 ed ELAVL1, e controlla la traduzione attraverso la fosforilazione di EIF4E2 mediata da MNK1/2. Inoltre, interagisce con la chinasi II della caseina per promuovere la fosforilazione di TP53. Riferimenti correlati: PMID:11154262 PMID:10747897

• p38 MAPK modula l'endocitosi dei recettori (ad es., internalizzazione dell'EGFR mediata dalla clatrina tramite fosforilazione dell'EGFR e degli effettori RAB5A) e lo shedding dell'ectodominio attivando la metalloproteasi ADAM17, collegando i segnali infiammatori alla segnalazione dei fattori di crescita. Riferimenti correlati: PMID:16932740 PMID:20188673

• Nel nucleo, fosforila direttamente i fattori di trascrizione ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, DDIT3, TP53, MEF2C e MEF2A, e potenzia il reclutamento di NF-kappa-B ai promotori dei geni infiammatori inducendo la fosforilazione della Ser10 dell'istone H3. Riferimenti correlati: PMID:10330143 PMID:9430721 PMID:9858528

• Fosforila CDC25B/C portando a un ritardo del ciclo cellulare G2 dopo la radiazione UV; targeting di TIAR per prevenire la degradazione dell'mRNA GADD45A; e attiva l'infammasoma NLRP1 tramite fosforilazione, promuovendo la piroptosi. Riferimenti correlati: PMID:11333986 PMID:20932473 PMID:35857590

• Espresso nel cervello, cuore, placenta, pancreas e muscolo scheletrico; gioca anche un ruolo essenziale nell'eritropoiesi regolando l'espressione del gene EPO. Durante l'infezione microbica, la fosforilazione da parte di M. tuberculosis EsxA inibisce la produzione di IFN-gamma nelle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:10943842 PMID:21586573

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è stato sviluppato contro un peptide sintetico corrispondente ai residui 100-200 della p38 MAPK umana (Q16539), una regione conservata nel topo e nel ratto, a supporto della reattività crociata osservata. Per il Western blot, è prevista una banda a circa 41 kDa. Titolare l'anticorpo e includere appropriati controlli positivi (ad es., cellule stimolate con anisomicina o stress osmotico) per confermare la reattività.
• L'anticorpo è validato KO, il che garantisce tipicamente la specificità del bersaglio; tuttavia, ogni sistema sperimentale è unico, pertanto validare utilizzando campioni knockout o knockdown con siRNA come appropriato.
• Per l'ELISA, considerare il rivestimento con p38 MAPK ricombinante purificato o lisati cellulari di cellule stimolate. Le condizioni del saggio potrebbero richiedere l'ottimizzazione della concentrazione di rivestimento, del blocco e dei passaggi di rilevamento.
• Come anticorpo monoclonale di coniglio, è generalmente adatto per risultati robusti e riproducibili. Abbinare a un appropriato anticorpo secondario anti-coniglio coniugato per il rilevamento nel proprio protocollo.

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