Anticorpo policlonale Anti-p47phox/NCF1 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - P14598

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di p47phox/NCF1

• Noto anche come fattore 1 del citosol dei neutrofili, NCF-47K, organizzatore Nox 2 (NOXO2) e p47-phox. È una subunità del complesso dell'ossidasi NADPH dei fagociti.
• Come parte del complesso dell'ossidasi NADPH, media il trasferimento di elettroni da NADPH a O2 per produrre l'anione superossido (PubMed:2547247, PubMed:2550933, PubMed:38355798). Questa generazione di superossido è critica per l'attività microbicida dei fagociti. Riferimenti correlati: PMID:2547247, PMID:2550933, PMID:38355798
• L'attivazione dell'ossidasi comporta il legame dipendente dalla fosforilazione di NCF1 al C-terminale di CYBA/p22-phox, promuovendo il traslocazione delle subunità citosoliche alla membrana (PubMed:12732142, PubMed:19801500). Riferimenti correlati: PMID:12732142, PMID:19801500
• La proteina contiene domini SH3 e PX, coinvolti nelle interazioni proteina-proteina e lipidiche, facilitando l'assemblaggio del complesso.
• La localizzazione subcellulare include citoplasma, citosol e membrana; è principalmente citosolica e si trasloca alla membrana dopo l'attivazione.
• Specificità tissutale: Rilevata a livello proteico nei monociti del sangue periferico e nei neutrofili.
• Le parole chiave evidenziano la sua associazione con la granulomatosi cronica (CGD), lo splicing alternativo, fosfoproteina e dominio SH3.
• Gioca un ruolo nella difesa dell'ospite, con mutazioni legate alla CGD, un'immunodeficienza caratterizzata da infezioni ricorrenti.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 1-390, coprendo l'intera sequenza proteica. Ciò potrebbe consentire il rilevamento di più isoforme se presenti.
• Per il Western blot, il peso molecolare atteso è di circa 45 kDa; considerare la verifica in lisati rilevanti di monociti/neutrofili umani, di topo o di ratto.
• Per l'immunofluorescenza, potrebbe essere richiesta la permeabilizzazione per rilevare il p47phox citosolico; validare il segnale nei fagociti attivati rispetto a quelli a riposo.
• Nell'immunoprecipitazione, l'anticorpo può co-precipitare altri componenti del complesso dell'ossidasi NADPH; confermare con controlli appropriati.
• Per l'ELISA, testare l'anticorpo come reagente di cattura o di rilevamento in un saggio sandwich; ottimizzare le concentrazioni e validare con standard noti.

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