Anticorpo policlonale coniglio anti-P4HA1 per WB, IF/ICC, ELISA - P13674

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di P4HA1

• La subunità alfa-1 della proil 4-idrossilasi (P4HA1), nota anche come subunità alfa-1 della procollagen-prolina 2-ossoglutarato 4-diossigenasi, è la subunità catalitica del complesso enzimatico collagene proil 4-idrossilasi.
• Catalizza la formazione post-traduzionale di 4-idrossiprolina nelle sequenze -Xaa-Pro-Gly- dei collageni e di altre proteine, un passaggio fondamentale per la stabilità della tripla elica del collagene.
• P4HA1 localizza nel lume del reticolo endoplasmatico, dove modifica le catene nascenti di procollagene durante la biosintesi.
• La proteina è espressa in più tessuti tra cui cuore, fegato, muscolo scheletrico, rene, placenta, polmone e pancreas.
• In quanto diossigenasi, P4HA1 richiede ferro e vitamina C come cofattori ed è un membro della famiglia delle ossigenasi dipendenti da 2-ossoglutarato.
• Le modificazioni post-traduzionali comprendono la glicosilazione; il gene è soggetto a splicing alternativo, che può generare più isoforme.
• Parole chiave: Struttura 3D, Splicing alternativo, Diossigenasi, Reticolo endoplasmatico, Glicoproteina, Ferro, Legame metalli, Ossidoreduttasi, Identificazione proteomica, Proteoma di riferimento, Segnale, Ripetizione TPR, Vitamina C.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 235-534 di P4HA1 umano. La specificità dell'anticorpo può essere confermata tramite ELISA di competizione peptidica o Western blot utilizzando proteina P4HA1 ricombinante.
• Per Western blot, il peso molecolare previsto è ~61 kDa; convalidare il test utilizzando lisati di controllo positivi da linee cellulari di uomo, topo o ratto che esprimono P4HA1.
• In immunofluorescenza/ICC, ci si aspetta che P4HA1 localizzi nel reticolo endoplasmatico; utilizzare co-colorazioni appropriate (ad es. marcatori di RE) per confermare.
• Per ELISA, valutare un formato diretto o sandwich e titolare l'anticorpo per ottenere un segnale ottimale con il peptide immunogeno o la proteina intera.
• Le prestazioni dell'anticorpo possono variare in base all'applicazione; si raccomandano studi pilota con controlli positivi e negativi noti.

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