Anticorpo policlonale di coniglio anti-P4HA3 per WB, IF/ICC, ELISA - Q7Z4N8

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di P4HA3

• P4HA3 (subunità alfa-3 della prolil 4-idrossilasi) è un enzima fondamentale per la biosintesi del collagene, che catalizza la formazione di 4-idrossiprolina nei motivi -Xaa-Pro-Gly-.
• Questa modificazione post-traduzionale è essenziale per la stabilità termica della tripla elica del collagene e per il corretto assemblaggio della matrice extracellulare.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme e la proteina presenta un peptide segnale, ripetizioni tetratricopeptidiche (TPR) e un dominio a coiled-coil.
• È localizzata principalmente nel lume del reticolo endoplasmatico, dove avviene la maturazione del collagene.
• È altamente espressa nella placenta, nel fegato e nella cute fetale; è inoltre rilevata nelle capsule fibrose delle lesioni aterosclerotiche e a livelli inferiori in altri tessuti.
• Appartiene alla famiglia P4HA delle diossigenasi dipendenti da 2-ossoglutarato e ferro; richiede vitamina C per la propria attività.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la glicosilazione e la proteina è nota per legare il ferro come cofattore.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 20–110) è rivolto alla regione N-terminale; eseguire un allineamento di sequenza per prevedere la reattività crociata in specie aggiuntive.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di 61 kDa; convalidare utilizzando lisati di controllo positivo provenienti da placenta o fegato.
• Per IF/ICC, ottimizzare le condizioni di permeabilizzazione per rilevare la proteina residente nel lume del reticolo endoplasmatico.
• L'ELISA può richiedere la titolazione sia dell'antigene di rivestimento sia dell'anticorpo per ottenere un segnale ottimale.

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