Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-P4HB per WB, IHC-P, ELISA - P07237

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di P4HB

• La proteina disolfuro-isomerasi (P4HB) è un enzima multifunzionale e chaperone del reticolo endoplasmatico, nota anche come PDI, PDIA1 e subunità beta della prolil 4-idrossilasi.
• Catalizza la formazione, la rottura e il riarrangiamento dei legami disolfuro nelle proteine nascenti, garantendo il corretto ripiegamento proteico nel lume del RE.
• Alla superficie cellulare, agisce come reduttasi che cliva i legami disolfuro delle proteine esofacciali, modulando la struttura e la funzione delle proteine di superficie. Riferimenti correlati: PMID:21670307
• Dopo la fosforilazione da parte di FAM20C, alte concentrazioni di P4HB funzionano come chaperone inibendo l'aggregazione di proteine mal ripiegate, mentre basse concentrazioni promuovono l'aggregazione (attività anti-chaperone). Riferimenti correlati: PMID:32149426
• Serve come subunità strutturale del complesso prolil 4-idrossilasi e della proteina microsomiale di trasferimento dei triacilgliceroli MTTP.
• La localizzazione subcellulare include il lume del reticolo endoplasmatico, i melanosomi e la membrana cellulare; viene anche secreta alla superficie cellulare dove interagisce con LGALS9.
• Parole chiave e associazioni patologiche: le mutazioni in P4HB sono collegate alla craniosinostosi e all'osteogenesi imperfetta; le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide C-terminale (aa 409-508) di P4HB umano; l'accessibilità dell'epitopo può essere influenzata dal ripiegamento proteico o dalle interazioni.
• Per il Western blotting (WB), ci si aspetta una banda intorno a 57 kDa. Utilizzare controlli di carico appropriati e validare la specificità dell'anticorpo utilizzando campioni knockdown o knockout.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), i metodi di recupero dell'antigene (es. recupero dell'epitopo indotto dal calore in tampone citrato, pH 6.0) possono migliorare il segnale. Ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo primario e le condizioni di incubazione.
• Per ELISA, considerare l'abbinamento di questo anticorpo monoclonale con un anticorpo policlonale di cattura o di rilevamento per saggi a sandwich; validare nella matrice di campioni pertinente.
• È riportata la reattività crociata con mouse e ratto; tuttavia, verificare l'omologia di sequenza della regione immunogenica tra le specie per confermare il legame se si utilizzano campioni non umani.
• Conservare l'anticorpo come raccomandato (la spedizione in borsa del ghiaccio indica la necessità della catena del freddo); evitare ripetuti cicli di congelamento-scongelamento.

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