Anticorpo monoclonale coniglio anti-p53 per WB, IP, ELISA - P04637

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di p53

• p53, noto anche come Antigene tumorale cellulare p53, Fosfoproteina p53 e Soppressore tumorale p53, è codificato dal gene TP53. Esistono multiple isoforme (ad es., l'isoforma 2 potenzia l'attività di transattivazione, l'isoforma 4 la sopprime, l'isoforma 7 inibisce l'apoptosi) con proprietà funzionali distinte.
• Agisce come fattore di trascrizione multifunzionale che induce l'arresto del ciclo cellulare, la riparazione del DNA o l'apoptosi legandosi alla sua sequenza di DNA bersaglio, funzionando come soppressore tumorale in molti tipi di tumore.
  Riferimenti correlati: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• L'induzione dell'apoptosi è mediata in parte dalla stimolazione dell'espressione di BAX e dell'antigene FAS, o dalla repressione dell'espressione di Bcl‑2; la sua attività pro‑apoptotica è regolata tramite interazioni con proteine della famiglia ASPP.
  Riferimenti correlati: PMID:12524540, PMID:17189187
• La localizzazione subcellulare include nucleo, citoplasma, mitocondri, reticolo endoplasmatico e centrosoma, consentendo uno spostamento dinamico in risposta ai segnali di stress cellulare.
• Subisce ampie modificazioni post‑traduzionali tra cui fosforilazione, acetilazione, metilazione e ubiquitinazione, che modulano la sua stabilità e attività trascrizionale.
• Regola l'orologio circadiano reprimendo l'attivazione trascrizionale di PER2 mediata da CLOCK‑BMAL1.
  Riferimenti correlati: PMID:24051492
• Espresso in modo ubiquitario nei tessuti normali con pattern dipendenti dall'isoforma; ad esempio, l'isoforma 2 è assente nel cervello, polmone e prostata, mentre l'isoforma 8 è rilevata solo in colon, midollo osseo, testicolo, cervello fetale e intestino.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 1–393 di p53 umano (NP_000537.3), comprendendo quasi l'intera sequenza; questo design può conferire il riconoscimento di epitopi attraverso molteplici domini funzionali, adatto per applicazioni come Western blotting, immunoprecipitazione ed ELISA.
• Essendo un anticorpo monoclonale validato KO, ci si aspetta che mostri un'elevata specificità; considerare l'uso di un lisato cellulare knockout per p53 come controllo negativo nel Western blotting per confermare l'identità della banda bersaglio.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di 44 kDa, ma le modificazioni post‑traduzionali e le variazioni delle isoforme possono risultare in bande multiple o un leggero spostamento; ottimizzare di conseguenza le quantità caricate e i tempi di esposizione.
• Per l'immunoprecipitazione, utilizzare protocolli standardizzati e includere un anticorpo di controllo isotipo per valutare il legame aspecifico.
• In ELISA, abbinare questo anticorpo con un appropriato anticorpo di rilevamento seguendo le procedure standard; validare nella matrice di campione rilevante per garantirne le prestazioni.

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