Anticorpo policlonale anti-PADI4 per WB, IHC-P, ELISA - Q9UM07

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PADI4

• PADI4 catalizza la citrullinazione (deiminazione) dei residui di arginina sugli istoni H1, H3 e H4, svolgendo un ruolo chiave nel codice istonico e nella regolazione del mantenimento delle cellule staminali. Modifica specificamente H1 in Arg-54, H3 in Arg-2, Arg-8, Arg-17 e/o Arg-26 e H4 in Arg-3. Riferimenti correlati: PMID:15339660 PMID:15345777 PMID:16567635
• La citrullinazione dell'istone H3 da parte di PADI4 impedisce la metilazione mediata da CARM1 e HRMT1L2/PRMT1, portando alla repressione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:15345777
• La citrullinazione mediata da PADI4 di H1 in Arg-54 (H1R54ci) provoca lo spostamento di H1 dalla cromatina, determinando la decondensazione globale della cromatina. Questo processo promuove la pluripotenza ed è fondamentale durante la risposta immunitaria innata nei neutrofili. Riferimenti correlati: PMID:15339660 PMID:15345777 PMID:16567635 PMID:18209087
• È essenziale per la formazione delle trappole extracellulari dei neutrofili (NET), mediando la citrullinazione dell'istone H3, la decondensazione della cromatina e la rottura della membrana nucleare. Riferimenti correlati: PMID:19153223 PMID:25622091 PMID:28574339
• PADI4 citrullina inoltre EP300/p300 in Arg-2142, potenziando l'interazione con NCOA2/GRIP1. Riferimenti correlati: PMID:15731352
• A livello subcellulare, PADI4 si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nei granuli citoplasmatici.
• Specificità tissutale: è espressa negli eosinofili e nei neutrofili, ma non nei monociti periferici o nei linfociti.
• Le parole chiave evidenziano il suo ruolo come idrolasi legante il calcio e i metalli, regolatore della cromatina e il suo coinvolgimento nell'immunità innata e nella regolazione trascrizionale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 290–663 e copre un'ampia regione C-terminale. L'anticorpo policlonale risultante dovrebbe riconoscere epitopi multipli, fornendo potenzialmente un segnale robusto nelle diverse applicazioni.
• In WB, si prevede una banda intorno a 74 kDa. Validare utilizzando un controllo positivo appropriato, come lisati di neutrofili o cellule staminali.
• Per IHC-P, prendere in considerazione sezioni di tessuto umano, murino o di ratto. Si prevede una colorazione intensa negli eosinofili e nei neutrofili; ottimizzare il recupero antigenico e la diluizione dell'anticorpo.
• Nell'ELISA, utilizzare la proteina PADI4 ricombinante o purificata per valutare la reattività. Titolare l'anticorpo e i reagenti di rilevazione per stabilire una concentrazione di lavoro adeguata.

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