Anticorpo policlonale di coniglio anti-PADI4 per WB, IF/ICC, ELISA - Q9UM07

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: funzione e localizzazione di PADI4

• La PADI4 (Proteina-arginina deiminasi di tipo 4) è un'idrolasi calcio-dipendente che catalizza la citrullinazione (deiminazione) dei residui di arginina nelle proteine target, svolgendo un ruolo chiave nella modifica post-traduzionale e nella regolazione della cromatina.
• Citrullina gli istoni: H1 in Arg-54 (H1R54ci), H3 in Arg-2/8/17/26 (H3R2ci, H3R8ci, H3R17ci, H3R26ci) e H4 in Arg-3 (H4R3ci), modulando così la dinamica del nucleosoma e l'espressione genica.
  Riferimenti correlati: PMID:15339660 PMID:15345777 PMID:16567635
• Nelle cellule staminali, la citrullinazione di H1R54ci mediata da PADI4 sposta l'istone H1 dalla cromatina, inducendo una decondensazione globale della cromatina e promuovendo il mantenimento della pluripotenza.
  Riferimenti correlati: PMID:15339660 PMID:15345777 PMID:16567635
• Durante le risposte immunitarie innate nei neutrofili, la PADI4 guida una profonda decondensazione della cromatina ed è essenziale per la formazione delle trappole extracellulari dei neutrofili (NET), che intrappolano ed eliminano i patogeni.
  Riferimenti correlati: PMID:18209087 PMID:19153223 PMID:25622091 PMID:28574339
• La citrullinazione dell'istone H3 da parte di PADI4 ne impedisce la metilazione da parte delle arginina metiltransferasi CARM1 e PRMT1, portando alla repressione trascrizionale.
  Riferimenti correlati: PMID:15345777
• Oltre agli istoni, la PADI4 citrullina anche substrati non istonici come l'acetiltransferasi EP300 (p300) in Arg-2142, che ne migliora l'interazione con il coattivatore NCOA2.
  Riferimenti correlati: PMID:15731352
• La PADI4 si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nei granuli citoplasmatici, coerentemente con i suoi ruoli nei processi sia citosolici che nucleari.
• La sua espressione è limitata principalmente agli eosinofili e ai neutrofili; non è rilevata nei monociti o nei linfociti periferici.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 290–663, comprendendo il dominio catalitico C-terminale; si prevede che l'anticorpo rilevi la PADI4 a lunghezza intera.
• Per il Western blotting (WB), il peso molecolare previsto è di 74 kDa; si consiglia di utilizzare linee cellulari di neutrofili (es. HL-60) o granulociti primari come controlli positivi.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), aspettarsi un pattern di colorazione citoplasmatico, nucleare e granulare; i protocolli di permeabilizzazione e fissazione potrebbero richiedere un'ottimizzazione.
• Per le applicazioni ELISA, validare la coppia di anticorpi con proteina PADI4 ricombinante o lisati cellulari per determinare le condizioni ottimali di rivestimento e rilevamento.

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