Anticorpo policlonale coniglio Anti-PAEP per WB, ELISA - P09466

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Glicodelina

• La Glicodelina (PAEP), nota anche come proteina placentare 14 (PP14), alfa-2 globulina endometriale associata alla gravidanza (PAEG) e fattore inibitore del legame con la zona pellucida 1 (ZIF-1), è una glicoproteina secreta. Quattro glicoforme—Glicodelina-S, -A, -F e -C—presentano glicosilazione e ruoli biologici distinti: la Glicodelina-A ha attività contraccettiva e immunosoppressiva, la Glicodelina-C stimola il legame spermatozoo-zona pellucida, la Glicodelina-F inibisce il legame spermatozoo-zona pellucida e la reazione acrosomiale, mentre la Glicodelina-S mantiene gli spermatozoi in stato non capacitato. Riferimenti correlati: PMID:7531163 PMID:9918684 PMID:17192260 PMID:12672671 PMID:15883155

• La Glicodelina è il principale prodotto secretorio dell'endometrio durante la fase luteale media e l'inizio della gravidanza. Presenta una distribuzione delle glicoforme specifica per tessuto: Glicodelina-A nel liquido amniotico, nell'endometrio/decidua e nel siero materno; Glicodelina-F nel liquido follicolare, nelle cellule granulose luteinizzate e nell'ovidotto; Glicodelina-S nel plasma seminale e nelle vescicole seminali; e Glicodelina-C nelle cellule del cumulo ooforo, dove viene assorbita e rimodellata nella sua glicane partendo dalla Glicodelina-A e -F. Riferimenti correlati: PMID:3667877 PMID:3194393 PMID:12672671 PMID:9239694 PMID:17192260

• La proteina è secreta nello spazio extracellulare.

• Il peso molecolare previsto del precursore non processato è di circa 20,6 kDa (UniProt), e la proteina matura migra a ~21 kDa in SDS-PAGE in condizioni riducenti.

• Le parole chiave di UniProt includono secrezione, glicoproteina, ponte disolfuro, peptide segnale e splicing alternativo, che indicano modifiche post-traduzionali e isoforme varianti. Una struttura 3D di questa proteina è stata risolta.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Questo anticorpo policlonale di coniglio è stato prodotto contro la regione matura (amminoacidi 19-180) della PAEP umana e riconosce probabilmente più epitopi. Dovrebbe essere adatto per rilevare la Glicodelina sia nativa sia denaturata nelle applicazioni WB e ELISA.
• Per la Western Blot, si consiglia di utilizzare SDS-PAGE riducente e un controllo positivo come lisato di tessuto endometriale umano o plasma seminale, poiché la Glicodelina è altamente espressa in questi tessuti. A causa della glicosilazione, la banda osservata può apparire leggermente più alta rispetto ai 21 kDa previsti. Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario (es. 1:500-1:2000) in base all'abbondanza del campione.
• Per l'ELISA, eseguire titolazioni a scacchiera per determinare la concentrazione di coating e la diluizione dell'anticorpo ottimali. L'anticorpo può essere utilizzato per formati di rilevazione diretti o indiretti.
• La reattività crociata è riportata solo per l'uomo; non si prevede che rilevi la Glicodelina di topo o ratto. Convalidare la specificità di specie nel sistema di analisi pertinente se necessario.

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