Anticorpo policlonale di coniglio anti-PAK3 per WB, IF/ICC, ELISA - O75914

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di PAK3

• PAK3 (Serina/treonina-proteina chinasi PAK 3) è un membro della famiglia delle chinasi attivate da p21 (PAK) ed è espresso prevalentemente nei neuroni post-mitotici della corteccia cerebrale e dell'ippocampo (UniProt O75914, SPECIFICITÀ TISSUTALE).
• Funziona come effettore a valle delle piccole GTPasi CDC42 e RAC1 e svolge un ruolo chiave nella regolazione del citoscheletro, nella migrazione cellulare e nella regolazione del ciclo cellulare (FUNZIONE).
• PAK3 è fondamentale per la morfogenesi delle spine dendritiche, la formazione delle sinapsi e la plasticità sinaptica; nei neuroni ippocampali, è necessario per la formazione di spine dendritiche e sinapsi eccitatorie (FUNZIONE, SPECIFICITÀ TISSUTALE).
• Dopo l'attivazione da parte di CDC42/RAC1, PAK3 subisce un cambiamento conformazionale e un'autofosforilazione sui residui di serina/treonina, quindi fosforila bersagli come MAPK4, MAPK6, MAPKAPK5 e TNNI3/troponina I per regolare la polimerizzazione dell'actina e la sensibilità al calcio (FUNZIONE).
• Ulteriori substrati includono la catena leggera regolatoria della miosina II (MLC), che collega l'attività chinasica di PAK3 alla contrattilità actomiosinica nelle spine dendritiche (FUNZIONE, Per similarità).
• La proteina si localizza nel citoplasma (LOCALIZZAZIONE SUBCELLULARE) e contiene un dominio di legame SH3 e un dominio simile all'ubiquitina (PAROLE CHIAVE: legame SH3, coniugazione Ubl).
• PAK3 è associato alla disabilità intellettiva legata al cromosoma X (MRX30, MRX47, XLID30) e forme varianti sono collegate alla malattia (PAROLE CHIAVE: Variante di malattia, Disabilità intellettiva).

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'anticorpo è stato generato contro un peptide sintetico della regione N-terminale (aa 1-100) di PAK3 umano (isoforma NP_001121638.1). Questa regione può essere presente in più isoforme; la specificità deve essere verificata utilizzando controlli specifici per l'isoforma.
• Per il Western blot, il peso molecolare atteso di PAK3 a lunghezza intera è di circa 62 kDa; preparare lisati da linee cellulari neuronali o tessuti cerebrali rilevanti e includere controlli positivi e negativi appropriati.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), considerare di testare protocolli di fissazione/permeabilizzazione e diluizioni anticorpali multipli per ottimizzare la rilevazione di PAK3 endogeno, che è citoplasmatico.
• Le applicazioni ELISA possono essere utilizzate per titolare l'anticorpo utilizzando il peptide immunizzante o la proteina ricombinante; è stata riportata una reattività crociata con proteine di topo e ratto, ma si raccomanda la validazione nel sistema di saggio specifico.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti può variare; si consiglia un test preliminare con il proprio setup sperimentale.

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