Anticorpo policlonale anti-PAM16 di coniglio per WB, ELISA - Q9Y3D7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PAM16

• PAM16 (sottounità 16 del motore associato alla traslocazione della presequenza) è noto anche come TIM16, MAGMAS, TIMM16 e CGI-136. È una componente del complesso translocasi TIM23/PAM responsabile dell'importazione di proteine codificate nel nucleo nella matrice mitocondriale.
• La proteina funge da regolatore chiave della translocazione proteica dipendente da ATP, modulando il motore di importazione associato al translocone TIM23.
• PAM16 inibisce direttamente DNAJC19, prevenendo una stimolazione eccessiva dell'attività ATPasica della chaperone mitocondriale HSPA9/Mortalin, controllando così il ciclo di importazione.
• È una proteina integrale della membrana interna mitocondriale, ancorata alla membrana interna del mitocondrio.
• PAM16 è espresso ubiquitariamente nei tessuti, coerentemente con il suo ruolo fondamentale nella biogenesi mitocondriale e nell'omeostasi proteica.
• Le annotazioni UniProt evidenziano il suo coinvolgimento nella variante della malattia (associata al nanismo), il suo stato di fosfoproteina e la sua classificazione come componente del proteoma di riferimento.
• Il peso molecolare previsto è di circa 13,8 kDa, coerente con la banda osservata di 14 kDa nel western blotting.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Poiché l'immunogeno copre gli amminoacidi 21-125, che esclude la sequenza di targeting mitocondriale N-terminale, l'anticorpo probabilmente riconosce la forma matura. Per il WB, prevedere una banda vicino a 14 kDa; considerare l'uso dell'arricchimento della frazione mitocondriale per un segnale migliorato.
• Quando si esegue l'ELISA, utilizzare tamponi di rivestimento appropriati e validare con proteine ricombinanti o lisati cellulari; questo policlonale potrebbe essere adatto sia come anticorpo di cattura che di rilevamento.
• È indicata la reattività crociata con umano e topo; validare nel proprio sistema di campione specifico (es. HeLa, HEK293 o tessuti murini).
• Dato che PAM16 è una proteina mitocondriale, assicurarsi che le condizioni di lisi siano compatibili con l'estrazione delle proteine di membrana, ad esempio utilizzando il tampone RIPA o kit specializzati per l'isolamento dei mitocondri.

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