Anticorpo monoclonale di coniglio anti-pan 14-3-3 per WB, IF/ICC, ELISA - P27348 / P31946 / P61981 / P62258 / P63104 / Q04917 / P31947

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del pan 14-3-3

• La famiglia proteica 14-3-3 negli esseri umani è composta da sette isoforme—beta, gamma, epsilon, eta, sigma, theta e zeta—codificate rispettivamente dai geni YWHAB, YWHAG, YWHAE, YWHAH, SFN, YWHAQ e YWHAZ, e sono riconosciute da questo anticorpo pan-specifico.
• Queste proteine adattatrici legano motivi fosfoserina/fosfotreonina su un'ampia gamma di molecole di segnalazione, modulando così le attività chinasi (ad es., regolazione negativa di PDPK1), l'apoptosi e le vie metaboliche.
• L'isoforma theta (P27348), nota anche come proteina 14-3-3 tau o HS1, è espressa abbondantemente nel cervello, nel cuore e nel pancreas, con livelli più bassi nel rene e nella placenta; la sua espressione è aumentata nel midollo spinale nella sclerosi laterale amiotrofica (SLA).
• Le proteine 14-3-3 si localizzano prevalentemente nel citoplasma, in linea con il loro ruolo nel trasdurre i segnali dalla membrana cellulare agli effettori intracellulari.
• Le modifiche post-traduzionali, inclusa acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione (formazione di legami isopeptidici), sono fondamentali per regolare la dimerizzazione, la stabilità e l'interazione con i partner delle proteine 14-3-3.
• Parole chiave da database curati: Struttura-3D, Acetilazione, Citoplasma, Sequenziamento proteico diretto, Legame isopeptidico, Nitrazione, Fosfoproteina, Identificazione proteomica, Proteoma di riferimento, Coniugazione Ubl.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale altamente conservata di 14-3-3 theta (NP_006817.1, amminoacidi 1-100), garantendo un ampio riconoscimento di tutti e sette gli isoformi umani; la reattività cross-specie in topo e ratto è stata confermata.
• Per il Western blot, sono attese multiple bande tra 27 e 29 kDa a causa della diversità degli isoformi; includere controlli positivi appropriati (ad es., lisati di HeLa, HEK293 o tessuto cerebrale) e validare i pattern delle bande con i profili di espressione noti.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), è necessaria la permeabilizzazione poiché il bersaglio è citoplasmatico; aspettarsi una colorazione diffusa, che può intensificarsi o ri-localizzarsi in risposta a stimoli specifici.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può fungere da reagente di cattura o di rilevamento, ma la concentrazione ottimale di rivestimento e le condizioni del saggio devono essere determinate empiricamente.

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