Anticorpo policlonale di coniglio anti-pan 14-3-3 per WB, ELISA - P27348 / P31946 / P61981 / P62258 / P63104 / Q04917 / P31947

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della famiglia delle proteine 14-3-3

• La famiglia delle proteine 14-3-3 è costituita da proteine adattatrici altamente conservate che regolano un ampio spettro di vie di segnalazione generali e specializzate.
• Queste proteine si legano a motivi di serina/treonina fosforilati presenti su numerosi partner, modulandone così l'attività, la localizzazione e la stabilità.
• La proteina 14-3-3 theta (codificata da P27348), nota anche come proteina 14-3-3 tau o HS1, è espressa abbondantemente nel cervello, nel cuore e nel pancreas, con livelli inferiori nel rene e nella placenta.
• A livello subcellulare, le proteine 14-3-3 sono localizzate prevalentemente nel citoplasma, dove interagiscono con diverse molecole di segnalazione.
• Le principali modifiche post-traduzionali della 14-3-3 theta includono acetilazione, nitrazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che possono modulare con precisione le sue funzioni regolatorie.
• La 14-3-3 theta regola negativamente l'attività chinasica di PDPK1 ed è sovraregolata nel midollo spinale lombare dei pazienti affetti da SLA sporadica con predominante coinvolgimento del motoneurone inferiore.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blotting, si consiglia di considerare inizialmente un intervallo di diluizione da 1:500 a 1:2000, ottimizzando mediante una serie di diluizioni nel sistema di campionamento pertinente.
• Quando si studiano interazioni dipendenti dalla fosforilazione, utilizzare tamponi di bloccaggio progettati per anticorpi fosfo-specifici, poiché le proteine 14-3-3 si legano a motivi di fosfoserina/treonina.
• Nelle applicazioni ELISA, verificare la compatibilità dell'antigene di rivestimento e validare le prestazioni con controlli positivi e negativi appropriati.
• A causa della reattività pan, possono comparire più bande intorno a 27–28 kDa; se è necessaria la discriminazione, verificare la specificità dell'isoforma utilizzando anticorpi specifici per l'isoforma.
• L'immunogeno ricombinante a lunghezza intera suggerisce che l'anticorpo possa riconoscere sia le conformazioni native sia quelle denaturate; per SDS-PAGE in condizioni riducenti, includere agenti riducenti come DTT o β-mercaptoetanolo.

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