Anticorpo Policlonale Rabbit Anti-PARN per WB, IF/ICC, ELISA - O95453

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della PARN

• PARN (Poly(A)-specific ribonuclease) è una 3'-esoribonuclease con una forte preferenza per le code poli(A) degli mRNA, che inizia la degradazione dell'mRNA dipendente dalla deadenilazione. Riferimenti correlati: PMID:10882133 PMID:11359775 PMID:12748283
• Interagisce sia con la coda 3'-poli(A) sia con la struttura 5'-cap, un accoppiamento essenziale per una deadenilazione efficiente. Riferimenti correlati: PMID:10882133 PMID:11359775 PMID:12748283
• PARN partecipa alla degradazione dell'mRNA mediata da nonsense (NMD) e alla degradazione degli mRNA instabili contenenti ARE, probabilmente attraverso l'interazione con KHSRP. Riferimenti correlati: PMID:10882133
• Al di là degli mRNA, PARN può tagliare le code poli(A) dei microRNA (ad esempio MIR21) e degli snoRNA H/ACA box, influenzandone la stabilità. Riferimenti correlati: PMID:22442037 PMID:25049417
• La proteina si localizza nel nucleo, nel citoplasma e nel nucleolo, riflettendo i suoi molteplici ruoli nel metabolismo dell'RNA.
• PARN è espressa ubiquitousamente nei tessuti umani e appartiene alla famiglia delle nucleasi deadenilanti; richiede magnesio come cofattore.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, e lo splicing alternativo genera più isoforme.
• Le mutazioni in PARN sono associate alla discheratosi congenita, che la collega alle disturbi della biologia dei telomeri.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre i 280 amminoacidi N-terminali; considera l'accessibilità dell'epitopo nella progettazione del tuo test. Per il WB, è suggerito un intervallo di diluizione iniziale di 1:500–1:2000 con un anticorpo secondario adatto, da ottimizzare in base al livello di espressione del tuo campione.
• Nell'IF/ICC, le condizioni di fissazione e permeabilizzazione (ad esempio metanolo vs PFA/Triton) possono influenzare la rilevazione dell'antigene; valida nella linea cellulare di tuo interesse. La distribuzione nucleare/citoplasmatica della PARN può richiedere controlli accurati di co-colorazione.
• Per l'ELISA, la natura policlonale può migliorare la cattura del segnale; considera l'abbinamento con un anticorpo monoclonale per un ELISA sandwich. Valida con proteina ricombinante o lisati cellulari che esprimono PARN umana.
• Il peso molecolare previsto è di ~73 kDa; confermalo eseguendo marcatori di peso molecolare appropriati e considera possibili spostamenti dipendenti dalle isoforme.

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