Anticorpo policlonale Anti-PARP1 per WB, IF/ICC, ELISA - P09874

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PARP1

• PARP1 è un enzima nucleare altamente conservato che catalizza il trasferimento di ADP-ribosio da NAD+ alle proteine bersaglio, svolgendo un ruolo chiave nella riparazione delle rotture semplici del DNA tramite la via della riparazione per escissione di basi (BER). Riferimenti correlati: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500
• Partecipa inoltre alla riparazione delle rotture doppie del DNA per ricombinazione omologa, promuovendo il reclutamento di fattori di riparazione nei siti danneggiati. Riferimenti correlati: PMID:26344098, PMID:30356214
• In risposta al danno al DNA, PARP1 media l'ADP-ribosilazione serica degli istoni, facilitando la decompattazione della cromatina e l'accesso dei fattori di riparazione; questa attività dipende dal suo cofattore HPF1. Riferimenti correlati: PMID:28190768, PMID:29954836, PMID:32028527
• Oltre alla riparazione del DNA, PARP1 agisce come regolatore trascrizionale, reprimendo o attivando la trascrizione modulando la struttura della cromatina o i fattori di allungamento. Riferimenti correlati: PMID:15607977, PMID:22464733, PMID:27256882
• PARP1 è un mediatore chiave del parthanatos, una via di morte cellulare indipendente dalle caspasi; durante l'apoptosi, la scissione da parte di caspase-3/7 genera un frammento che si trasloca nel citoplasma e innesca la morte cellulare mediata da AIFM1. Riferimenti correlati: PMID:33168626
• La proteina si localizza prevalentemente nel nucleo e sui cromosomi, ed è presente anche nel nucleolo; può inoltre traslocare nel citoplasma in determinate condizioni.
• PARP1 è soggetto a estese modifiche post-traduzionali, in particolare l'auto-poli-ADP-ribosilazione, che regola la sua attività; contiene anche molteplici motivi a dito di zinco critici per il legame con il DNA.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno (aa 81-390) si trova nel dominio di legame con il DNA; se stai studiando l'apoptosi, verifica che l'anticorpo riconosca sia PARP1 a lunghezza intera che quello frammentato.
• Per Western blot, PARP1 ha un peso molecolare stimato di ~113 kDa; utilizza condizioni di trasferimento adatte per proteine di grandi dimensioni.
• Nel IF/ICC, assicura una fissazione e permeabilizzazione adeguate per rilevare PARP1 nucleare; effettua una colorazione simultanea con un marcatore di danno al DNA per confermare la localizzazione.
• Per ELISA, titola l'anticorpo e utilizza agenti di blocco adatti per ridurre al minimo il segnale di fondo.
• Poiché si tratta di un anticorpo policlonale, è necessario convalidare la coerenza tra lotti diversi.

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