Anticorpo policlonale Anti-PARP1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09874

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PARP1

• PARP1 è un enzima nucleare che catalizza la poli(ADP-ribosil)azione delle proteine target, svolgendo un ruolo centrale nella riparazione del DNA, nel mantenimento del genoma e nella morte cellulare. Riferimenti correlati: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500
• Come sensore del danno al DNA, PARP1 si lega alle rotture singole e doppie del filamento e, insieme a HPF1, catalizza l'ADP-ribosilazione serina di istoni e altre proteine della cromatina per promuovere il rilassamento cromatinico e il reclutamento di fattori di riparazione. Riferimenti correlati: PMID:17177976, PMID:18172500, PMID:19344625, PMID:28190768, PMID:29954836
• PARP1 può anche mediare l'ADP-ribosilazione di glutammato/aspartato tramite interazione con NMNAT1, e l'ADP-ribosilazione di tirosina con HPF1, dimostrando una specificità di residuo dipendente dal cofattore. Riferimenti correlati: PMID:25043379, PMID:28190768, PMID:29954836, PMID:30257210
• Oltre alla riparazione, PARP1 funziona come regolatore trascrizionale, agendo sia come repressore (modificando la struttura della cromatina) sia come fattore di elongazione positivo o negativo a seconda del contesto. Riferimenti correlati: PMID:15607977, PMID:22464733, PMID:27256882, PMID:35393539
• PARP1 partecipa alle vie di morte cellulare programmata: la sua proteina full-length è coinvolta nella parthanatos, mentre la clivaggio dipendente dalla caspasi genera un frammento di 89 kDa che promuove l'apoptosi mediata da AIFM1. Riferimenti correlati: PMID:33168626
• Subcellolarmente, PARP1 si localizza principalmente nel nucleo e nel nucleolo, ma può traslocare nel citoplasma o legarsi ai cromosomi, specialmente durante il danno al DNA o l'apoptosi.
• PARP1 contiene più domini a dito di zinco per il legame al DNA e un dominio catalitico, e la sua attività è regolata da modifiche post-traduzionali tra cui l'auto-ADP-ribosilazione, l'acetilazione e la fosforilazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio catalitico C-terminale (aa 662-1014). Pertanto, l'anticorpo può riconoscere sia PARP1 full-length (~113 kDa) sia il frammento C-terminale clivato dalla caspasi (~89 kDa) in WB. Per studi sull'apoptosi, si consiglia di utilizzare induttori appropriati e convalidare i pattern di clivaggio.
• In IHC-P, è prevista una colorazione prevalentemente nucleare; tuttavia, segnali citoplasmatici o nucleolari possono comparire a seconda dello stato cellulare o della processazione del tessuto. Includere sempre controlli positivi (es. cellule proliferanti) e negativi.
• Per IF/ICC, i protocolli di permeabilizzazione e fissazione devono essere ottimizzati, poiché PARP1 è strettamente legato alla cromatina. La fissazione con Triton X-100 o metanolo può essere utile.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere la titolazione dell'anticorpo; possono essere utilizzati antigeni ricombinanti o lisati cellulari.

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