Anticorpo policlonale anti-PBEF/Visfatin/NAMPT per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P43490

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PBEF/Visfatin/NAMPT

• PBEF/Visfatin/NAMPT, noto anche come nicotinamide fosforibosiltransferasi, fattore di potenziamento della colonia di cellule pre-B 1 o visfatina, è l'enzima limitante nella biosintesi del NAD mammifero, catalizzando la condensazione della nicotinamide con 5-fosforibosil-1-pirofosfato per produrre mononucleotide di nicotinamide.
• La proteina esiste in più forme: intracellulare come enzima attivo e in una forma secreta che agisce come citochina (immunomodulatrice) e adipochina (antidiabetica), sebbene la forma secreta manchi di attività enzimatica a causa dei bassi livelli extracellulari di ATP.
• Gioca un ruolo chiave nella regolazione del ritmo circadiano attraverso la produzione oscillatoria dipendente da NAMPT di NAD, che modula l'attività trascrizionale di CLOCK-BMAL1 tramite soppressione mediata da SIRT1 dipendente da NAD.
• Codificato dal gene NAMPT (noto anche come PBEF o PBEF1), è una glicosiltransferasi coinvolta nella biosintesi dei nucleotidi piridinici.
• A livello subcellulare, NAMPT si trova nel nucleo, nel citoplasma e può essere secreto nello spazio extracellulare.
• L'espressione tissutale è prominente nel midollo osseo, nel fegato e nei muscoli, con presenza aggiuntiva nel cuore, nella placenta, nei polmoni e nei reni.
• La proteina subisce multiple modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione e fosforilazione, che possono regolare la sua funzione e localizzazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 181-382 di NAMPT umano, una regione che potrebbe essere accessibile per il legame dell'anticorpo in varie conformazioni; considerare le condizioni denaturanti rispetto a quelle native in base all'applicazione.
• Per WB, è prevista una banda intorno a 56 kDa; convalidare nei lisati da campioni umani, di topo o di ratto per confermare il rilevamento.
• IHC-P e IF/ICC potrebbero richiedere l'ottimizzazione della fissazione e della permeabilizzazione per rilevare sia i pool nucleari/citoplasmici che quelli di proteina secreta.
• Le applicazioni ELISA possono essere progettate per catturare la forma solubile di NAMPT nel siero o nei sobbreni colturali; includere standard e controlli appropriati.
• Quando si utilizzano specie reattive crociate, verificare l'omologia della sequenza nella regione immunogenica per garantire il riconoscimento specifico.

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