Anticorpo monoclonale coniglio anti-PBEF/Visfatin/NAMPT per WB, IHC-P, ELISA - P43490

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PBEF/Visfatin/NAMPT

• PBEF/Visfatin/NAMPT, noto anche come nicotinamide fosforibosiltransferasi, è una proteina da 56 kDa che funge da enzima limitante nella biosintesi del NAD nei mammiferi, catalizzando la condensazione della nicotinamide con il 5-fosforibosil-1-pirofosfato per produrre mononucleotide di nicotinamide.
• Oltre al suo ruolo enzimatico, la forma secreta di NAMPT agisce come citochina (PBEF) con proprietà immunomodulatrici e come adipochina (visfatina) con potenziali effetti anti-diabetici; questa forma lacks attività enzimatica a causa della bassa disponibilità di ATP nello spazio extracellulare.
• NAMPT contribuisce alla regolazione dell'orologio circadiano guidando la produzione oscillatoria di NAD, che modula l'attività dell'eterodimero CLOCK-BMAL1 attraverso la deacetilazione mediata da SIRT1, influenzando l'espressione genica ritmica.
• La proteina localizza nel nucleo, nel citoplasma ed è anche secreta; la sua distribuzione subcellulare è coerente con i suoi ruoli bifunzionali nel metabolismo e nella segnalazione intercellulare.
• NAMPT è altamente espresso nel midollo osseo, nel fegato e nei muscoli, con presenza aggiuntiva nel cuore, nella placenta, nei polmoni e nei reni, riflettendo le sue ampie funzioni metaboliche e immunologiche.
• Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che possono regolare la sua attività enzimatica, stabilità o secrezione in diverse condizioni fisiologiche.
• Strutturalmente, NAMPT appartiene alla famiglia delle glicosiltransferasi e la sua struttura 3D è stata risolta, fornendo approfondimenti sul legame del substrato e sul meccanismo catalitico.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli aminoacidi 300–400 di NAMPT umano; considerare l'accessibilità dell'epitopo in condizioni native rispetto a quelle denaturate durante la pianificazione degli esperimenti.
• Per il Western blot, è prevista una banda vicino a 56 kDa; validare con lisati appropriati da tessuti umani, murini o di ratto e utilizzare controlli positivi e negativi per confermare la specificità.
• Per IHC-P, potrebbero essere richiesti metodi appropriati di recupero dell'antigene; considerare il test su tessuti con nota alta espressione (es. fegato, midollo osseo) e includere controlli di isotipo.
• Nelle applicazioni ELISA, l'abbinamento di questo anticorpo con un reagente di rilevamento mirato a un epitopo non sovrapposto potrebbe consentire lo sviluppo di saggi a sandwich; validare nelle matrici di campione pertinenti.

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