Anticorpo policlonale anti-PCMT1 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - P22061

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PCMT1

• PCMT1 (Proteina-L-isoaspartato(D-aspartato) O-metiltransferasi), noto anche come PIMT, è codificato dal gene PCMT1 (UniProt P22061) e funziona come metiltransferasi di riparazione.
• Avvia la riparazione delle proteine danneggiate catalizzando la metil-esterificazione dei residui anormali L-isoaspartilici e D-aspartilici che si accumulano spontaneamente nei peptidi e nelle proteine invecchiate. Riferimenti correlati: PMID:3167043, PMID:6469980
• I substrati noti includono EIF4EBP2, proteina 2 associata ai microtubuli, calreticulina, catene leggere della clatrina, isoenzima L1 dell'idrolasi C-terminale dell'ubiquitina, proteina 1 legante la fosfatidiletanolammina, statmina e sinucleine (per similarità).
• Si localizza prevalentemente nel citosol, coerentemente con il suo ruolo nella riparazione delle proteine intracellulari.
• Appartiene alla superfamiglia delle metiltransferasi, utilizzando S-adenosil-L-metionina come donatore di metile; l'enzima è anche soggetto ad acetilazione e subisce splicing alternativo.
• Il peso molecolare calcolato della proteina non modificata è di circa 24,6 kDa; l'anticorpo rileva una banda endogena intorno a 25 kDa.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli aminoacidi 62–286 del PCMT1 umano, una regione conservata; ci si aspetta che l'anticorpo riconosca il PCMT1 a lunghezza intera così come le isoforme che condividono questo epitopo.
• Per il western blot (WB), considerare l'utilizzo di un protocollo standard SDS-PAGE riducente e validare il rilevamento nella specie target; la reattività riportata include umano, mouse e ratto.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), ottimizzare le condizioni di fissaggio e permeabilizzazione poiché il segnale può essere influenzato dal contesto cellulare; includere i controlli appropriati.
• Questo anticorpo policlonale è adatto per l'immunoprecipitazione (IP) e l'ELISA; tuttavia, le condizioni individuali del saggio (es. diluizione dell'anticorpo, tempo di incubazione) devono essere determinate empiricamente.
• La reattività crociata con altre specie non è stata completamente caratterizzata; quando si lavora con tessetti non verificati, eseguire un esperimento pilota.

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