Anticorpo policlonale anti-PCSK1 per WB, IF/ICC, ELISA - P29120

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della PCSK1

• La convertasi neuroendocrina 1, nota anche come proormone convertasi 1 (PC1) o proproteina convertasi 1, è codificata dal gene PCSK1 e appartiene alla famiglia delle proproteine convertasi simili alla subtilisina/chexina. Lo splicing alternativo produce multiple isoforme.
• Funziona come una endoproteasi serinica calcio-dipendente che cliva specificamente le proteine precursore in siti costituiti da coppie di amminoacidi basici (es. Lys-Arg, Arg-Arg), un passaggio critico nella maturazione di numerosi proormoni e neuropeptidi.
• I principali substrati includono la proopiomelanocortina (POMC), la proinsulina, il proglucagone, la prorenina, la proenkefalina, la prodinorfina e la proteina correlata all'agouti (AGRP), regolando così l'omeostasi energetica, la risposta allo stress e la segnalazione neuroendocrina.
• A livello subcellulare, la PCSK1 è localizzata nelle vescicole secretorie, inclusi i granuli a denso core della via secretoria regolata nelle cellule neuroendocrine e nei neuroni.
• La proteina è sintetizzata come zimogeno inattivo con un prodominio N-terminale (rimosso dopo l'attivazione) e subisce clivaggio autocatalitico, N-glicosilazione e formazione di ponti disolfuro per generare la proteasi matura e attiva.
• Le varianti della PCSK1 associate alle malattie sono collegate all'obesità e ai disturbi metabolici (es. BMIQ12), così come a diarrea malassorbitiva grave e anomalie endocrine, sottolineando la sua importanza fisiologica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla porzione N-terminale (aa 28-170) della PCSK1 umana, che include parte del prodominio e del dominio catalitico; l'anticorpo può riconoscere sia il precursore a lunghezza intera (~84 kDa) sia le forme processate.
• Per il Western blot, considerare l'uso di controlli positivi da tessuti neuroendocrini umani, di topo o di ratto (es. ipofisi, ipotalamo, isole pancreatiche) e ottimizzare il carico proteico e le condizioni di blocco della membrana.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, prevedere un pattern di colorazione citoplasmatica puntiforme coerente con la localizzazione nelle vescicole secretorie; la permeabilizzazione deve essere sufficiente per permettere all'anticorpo di accedere ai compartimenti intracellulari.
• Eseguendo l'ELISA, validare la compatibilità della coppia di anticorpi e gli effetti della matrice nel tipo di campione; l'immunogeno ricombinante può fungere da standard di riferimento positivo.
• Data la reattività crociata con topo e ratto, questo anticorpo è adatto per studi traslazionali su modelli roditori di obesità, diabete o disfunzione neuroendocrina.

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