Anticorpo policlonale di coniglio anti-PD-L1/CD274 per WB, IHC-P, ELISA - Q9NZQ7

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del PD-L1

• PD-L1 (ligando 1 della morte cellulare programmata 1), noto anche come B7-H1 o CD274, è una proteina transmembrana di tipo I appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline. Contiene un dominio V-like di tipo Ig e un dominio C2-like di tipo Ig, ed è soggetto a splicing alternativo e glicosilazione.
• Come ligando per il recettore inibitorio PDCD1/PD-1, il PD-L1 svolge un ruolo critico nel mantenimento della tolleranza immunitaria periferica, modulando la soglia di attivazione dei linfociti T e limitando le risposte effattrici dei linfociti T. Riferimenti correlati: PMID:11015443 PMID:28813410 PMID:28813417
• La via inibitoria mediata da PDCD1 è sfruttata dai tumori per sopprimere l'immunità anti-tumorale, consentendo l'evasione immunitaria. Il blocco dell'interazione PD-L1/PD-1 può invertire l'esaurimento dei linfociti T e ripristinare le risposte anti-tumorali, sottolineando la sua importanza nell'immunoterapia del cancro. Riferimenti correlati: PMID:28813410 PMID:28813417
• Il PD-L1 può anche costimolare sottopopolazioni di linfociti T che producono prevalentemente interleuchina-10 (IL-10) attraverso un recettore attivante sconosciuto. Riferimenti correlati: PMID:10581077
• In risposta all'ipossia, il PD-L1 può translocare nel nucleo tramite interazione con STAT3 fosforilato, dove agisce come coattivatore della trascrizione per promuovere la trascrizione di GSDMC e indurre piroptosi. Riferimenti correlati: PMID:32929201
• A livello subcellulare, il PD-L1 si localizza principalmente sulla membrana cellulare, ma si trova anche sugli endosomi precoci e di riciclo, nel nucleo e può essere secreto.
• L'espressione tissutale è ampia; il PD-L1 è altamente espresso nel cuore, nel muscolo scheletrico, nella placenta e nel polmone, con un'espressione moderata nelle cellule immunitarie, inclusi i linfociti T e B attivati, le cellule dendritiche e i monociti.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (residui del dominio extracellulare 19–238) mira a una regione probabilmente accessibile sul PD-L1 nativo, rendendo questo anticorpo adatto per il rilevamento sia delle forme legate alla membrana che di quelle solubili. Per il Western blot, considerare l'uso di condizioni riducenti e caricare una quantità appropriata di proteina; è prevista una banda intorno a 33kDa.
• Per IHC-P, il recupero dell'antigene (indotto dal calore in tampone citrato, pH 6.0) può migliorare il rilevamento; titolare l'anticorpo per ottimizzare la colorazione specifica. Validare in tessuti noti positivi come la placenta o campioni tumorali.
• Data la reattività crociata con topo e ratto, questo anticorpo può essere utilizzato per studi interspecie. In tali casi, verificare la specificità del segnale utilizzando controlli appropriati (es. tessuto knockout).
• Dato che il PD-L1 è spesso glicosilato e può apparire come una macchia o bande multiple in alcuni sistemi, sono raccomandate condizioni denaturanti e riducenti per il WB.

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