Anticorpo policlonale di coniglio anti-PDCD4 per WB, IF/ICC, ELISA - Q53EL6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PDCD4

• PDCD4, noto anche come H731 o proteina inibitrice della trasformazione neoplastica, è un soppressore tumorale e regolatore dell'apoptosi codificato dal gene PDCD4.
• Inibisce l'inizio della traduzione e la traduzione cap-dipendente ostacolando l'interazione tra EIF4A1 ed EIF4G e sopprimendo l'attività elicasi di EIF4A.
• PDCD4 modula l'attivazione della chinasi JNK e sottoregola MAP4K1, influenzando la trascrizione dipendente da MAPK85 e JUN, un processo importante per l'inibizione dell'invasione cellulare.
• La localizzazione subcellulare comprende sia il nucleo sia il citoplasma.
• È sovraregolato nelle cellule proliferative ed è altamente espresso nelle cellule epiteliali della ghiandola mammaria, mentre presenta un'espressione ridotta nel cancro polmonare e nel carcinoma del colon, a sostegno del suo ruolo di soppressore tumorale.
• Le modificazioni post-traduzionali includono fosforilazione e acetilazione; è una fosfoproteina e una proteina coniugata all'ubiquitina, contenente sequenze ripetitive.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme.
• Dal punto di vista funzionale, può svolgere un ruolo nell'apoptosi e legare l'RNA (per similarità).

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, si consiglia di utilizzare una preparazione del campione in condizioni riducenti e di validare la banda a circa 52 kDa in lisati di tessuti o linee cellulari umani, murini o di ratto.
• L'immunogeno copre la regione N-terminale (aa 1–260); pertanto, l'anticorpo può rilevare il PDCD4 a lunghezza completa e potenzialmente alcune isoforme: confermare la specificità con controlli appropriati.
• Per IF/ICC, fissare e permeabilizzare le cellule in modo ottimale; poiché PDCD4 è localizzato sia nel nucleo sia nel citoplasma, è previsto un segnale in entrambi i compartimenti.
• Includere un controllo positivo, come una linea cellulare con espressione nota di PDCD4 (ad esempio cellule proliferative o epiteliali), e un controllo negativo (ad esempio cellule con PDCD4 silenziato) per verificare le prestazioni dell'anticorpo.
• I protocolli ELISA possono essere sviluppati utilizzando la proteina PDCD4 ricombinante come standard; titolare l'anticorpo per determinare le concentrazioni di lavoro ottimali.

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